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- 文献和实验
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99
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爱必信(上海)生物科技有限公司
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50mL
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文献和实验,先将 CFSE 染色和不染色的细胞 2 倍稀释,每孔 100 μl 细胞铺板。将 ConA 储存液进行 100 倍稀释,在 ConA 组中每孔加入 100 μl 配置好的 ConA 工作液,使得终浓度为 5 μg/ml(这时就是 200 倍稀释啦),在 PBS 组中加入 100 μl 完全培养基(这样铺板密度就为 5×105/ 孔)。将细胞培养板置于 37 ℃,5% CO2 的培养箱中培养 72 小时。4. 流式上机检测收集各组细胞,染色组细胞进行 CD3 表面染色,以对脾细胞中的淋巴细胞的增殖
细胞培养物污染往往是细胞培养实验室中最常见的问题,有时会造成非常严重的后果。细胞培养污染物可分为两大类,一类是化学污染物,如培养基、血清和水中的杂质,包括内毒素、增塑剂和洗涤剂,另一类是生物污染物,如细菌、霉菌、酵母、病毒和支原体,以及其他细胞系的交叉污染。虽然污染无法完全消除,但可以通过全面了解其来源并遵循良好的无菌技术来降低污染的发生频率和严重性。本文将概述主要的生物污染类型。 细菌 细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米,其形状多样,如球状、杆状和螺旋状等。由于分布
素、链霉素等)是影响转染的培养基添加物。由于阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性,使得对真核细胞无毒的抗生素进入细胞,从而降低细胞活性,导致转染效率降低。因此,应避免在转染前细胞铺板时和在转染培养基中使用抗生素,在转染前也不必润洗细胞。 03细胞状态 众所周知,细胞的生长状态影响实验结果,原代细胞和传代次数多的细胞都不是最佳选择,处于对数生长期的细胞生长状态最好,最适合转染。有文献研究传代不要超过17代,细胞复苏后的3代左右时细胞状态最好,传代过多细胞形态都会发生变化。大多数已建立的细胞系都是
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