人原代肝细胞维持培养基

为什么要使用原代肝细胞？

器官，肝脏毒性也是药物安全性检测时必须要测试的项目之一。 原代肝细胞作为一种体外模型，在药学研究方面具有极大优势——能获得大量性状较为统一的样本，很好的保留了与体内一致的细胞色素 P450 酶的水平，基本维持了肝脏在体内时的代谢功能。无论是机理性研究还是肝毒性研究都非常合适。 因此在药物研发的临床前阶段和临床阶段，在毒代动力学中，使用包括人类在内的哺乳动物的原代肝细胞，建立体外肝模型，是首选的研究方式。   03  环境安全 各类

原代细胞的培养和维持

一、原代细胞的培养与维持1、静置贴壁细胞（包括半贴壁细胞的培养）凡经消化液处理实体组织来源的细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性，细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L,培养基可用Eagle（MEM）或DNEM培养，小牛血清浓度为10%~80%。在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮。贴壁细胞长成网状或基本单层时，由于营养缺乏，代谢产物增多，pH变酸，不适宜细胞生长，此时细胞还未长成单层，未达到饱和密度，仍需继续培养，因此，需采取换液方式来更新

关于ADMET—正确选择原代肝细胞

，足足尝试分离 了大半年的肝细胞就是不能满足试验要求，这样他们非常抓狂！ 他们从一些同学口中得知我们从事了十多年的动物原代细胞，他们在校的时候用过我们的大鼠间充质干细胞和心肌细胞，效果很好。于是抱着试试看的想法联系到我 们。得知他们的需求后我们提出给予一管肝细胞的试用装，并且告知我们的肝细胞来源于美国DrAlbert Li所创立的IVAL(in vitro ADMET Laboratories)公司生产。该公司可以提供人源，大鼠，小鼠，狗，猴子来源的肝细胞，肝细胞有两种：悬浮状态用于代谢