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- 2025年07月11日
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爱必信（上海）生物科技有限公司
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25mg
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文献和实验点击链接下载全文： 电化学发光免疫分析法测定TSH,FT3,FT4的临床应用.pdf
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
前期记录CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 确定目标基因CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 目标基因背景调查CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- sgRNA 及引物设计CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 构建 sgRNA+Cas9 载体golden gate 构建好载体，酶切验证成功293FT 细胞转染验证1. sgRNA+pSpCas9 载体用 lipofectamine 3000 转染至 293FT 细胞（按照转染试剂的说明书走），确保转染效率> 70
移码突变 frameshift mutation，phase shi-ft mutation
移码突变 frameshift mutation， phase shi-ft mutation 在基因 DNA中插入或缺失非 3的倍数的少数几个碱基，因而在该基因 DNA作为蛋白质的氨基酸顺序的信息解读时，读码的框架会发生移动，这样的突变称为移码突变。吖啶橙 -类诱变剂可以诱发这类突变。如图所示，丝氨酸的密码子和甘氨酸的密码子之间插入了一个鸟甙酸（ G），由于在蛋白质合成时每三个邻接的碱基和一个氨基酸相对应，所以解读框段（ reading frame）向左面一个碱基移动
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