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文献和实验Gene Knockout Techniques(1) The Knockout Process
for mutations in unc-22Day 8 (Wednesday) unc-22 is a large gene that makes a good test target for mutagenesis. Mutations that knock out unc-22 produce a dominant "twitching" phenotype when the animals are exposed to 1% nicotine. The presence of twitchers
以最火热的 p53 为例Step1 先找 p53 基因序列1. NCBI--输入 p53 并选择物种 human：tumor protein p53 [Homo sapiens (human)]https://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene2. Ctrl+F，输入 sequence，快速定位（当然其实拉下去就是了），点击 Genebank3. 下载 p53 基因序列4. 用 SnapGene 软件打开序列，并简单了解每个元件最好是可以学一下 SnapGene 这个软件的使用
者们在小鼠受精卵分裂到二细胞期时，只编辑其中一个卵裂球，并用红色荧光蛋白标记。在小鼠胚胎发育到 14.5 天时，对小鼠胚胎细胞进行流式细胞分选，分选出基因编辑细胞和未编辑细胞，再测序比较两组差异 [7]。GOTI 方法流程图 [7]参考文献：[1] Fu Y, et al. High-frequency off-target mutagenesis induced by CRISPR-Cas nucleases in human cells. Nature Biotechnology, 2013
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