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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 英文名:
CleanRNA DNase I (2 U/uL)
- 保质期:
一年
- 供应商:
魔兜儿
- 保存条件:
-15℃~ -25℃
- 规格:
500U/2KU/10KU
| 规格: | 500U | 产品价格: | ¥710.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 2KU | 产品价格: | ¥2160.0 |
| 规格: | 10KU | 产品价格: | ¥7100.0 |
产品简介
DNA 酶 I 是一种内切酶 ,可以消化单链和双链 DNA,产生单脱氧核苷酸或单链或双链寡脱氧核苷酸。它能 水解磷酸二酯键,生成含有 5'-磷酸基团和 3'-OH 基团的单脱氧核苷酸和寡脱氧核苷酸。DNA 酶 I 可以催化 多种形式的 DNA,如单链 DNA、双链 DNA ,甚至染色质(其切割速度受组蛋白影响)。DNase I 广泛用于 制备无 dna RNA;体外转录后去除模板 DNA;在 RT-PCR 和 RT-qPCR 反应前制备无 dna RNA;与 DNA 聚合酶 I 结合 ,通过缺口易位进行 DNA 标记;DNA 片段文库建设。
本品按 GMP 工艺要求生产 ,产品以液体形式提供。
产品信息
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货号 |
N120005E/N120005S/N120005M |
|
规格 |
500 U/2000 KU/10 KU |
产品性质
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来源 |
重组 dna 酶 I 基因大肠杆菌 |
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最适温度 |
37℃ |
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储存缓冲液 |
10 mM Tris-HCl pH 7.6 ,2 mM CaCl2 ,50%(v/v) Glycerol |
|
活性单位定义 |
以小牛胸腺 DNA 为底物,在 25°C 和 pH 5.0 条件下,在 1 分钟内将反应溶液 260 nm 处的吸光度提高 0.001 所需的酶量定义为一个活性单位(Kunitz unit)(反应缓冲液 为 :10 mM Tris-HCl pH 7.6, 2.5 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2, 1 μg 质粒 DNA) |
组分信息
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组分编号 |
组分名称 |
N120005S (500 U) |
N120005M (2 KU) |
N120005M (10 KU) |
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N120005 |
CleanRNA 脱氧核糖核酸酶 I(2U/uL) |
100 μL |
1 mL |
1 mL |
储存条件
干冰装运 ,可在-15℃~ -25℃下保存一年。
注意事项
1. 酶在使用时应保存在冰盒或冰浴中 ,使用后应立即保存在-20°C。
2. 为了您的安全和健康 ,操作本产品时请穿戴个人防护装备(PPE) ,如实验室工作服和一次性手套。
使用说明
1. 质粒模板消化
1) 反应系统:
使用无 rnase 离心管和移液头制备如下反应体系:
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10× DNase I Buffer* |
1 μL |
|
DNase I |
1 μL |
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RNA |
x |
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Rnase-free ddH2O |
Up to 10 μL |
【注意】 1×DNase I 缓冲液:10 mM Tris-HCl ,2.5 mM MgCl2, 0.5 mM CaCl2 ,pH7.6 @25℃。
2) 反应条件
37℃ , 15- 30min 后,加入终浓度为 2.5 mM 的 EDTA 溶液,在 65℃下搅拌 10 min。处理后的模板可用于 后续反应 ,如盖帽反应。
2. DNase I 失活或抑制
加入 EDTA 至终浓度 2.5 mM 后,65℃加热 10min 可使 DNase I 失活。本酚和氯仿萃取也可使 DNase I 失 活。以下条件对 DNase I 均有显著抑制作用:金属离子螯合剂、浓度为毫摩尔/升的锌离子、0.1% SDS、
DTT、巯基乙醇等还原剂 ,盐浓度在 50-100 mM 以上。
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文献和实验Preparation of DNA Template For Direct Sequencing of Large Insert PAC and BAC Plasmid
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