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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海淳麦生物
- 适应物种:
人/大鼠/小鼠等各类物种
- 样本:
血清 细胞等
- 规格:
48T/96T
产品名称:内β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)ELISA试剂盒
用途
该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其他相关生物液体中天然及部分内β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)ELISA试剂盒需自备的设备及试剂
1、450±10nm 滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、单道或多道微量加液器及吸头
3、稀释样品的EP 管
4、蒸馏水或去离子水
5、吸水纸
6、盛放洗液的容器
内β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)ELISA试剂盒储存及有效期:
1、未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶
液A、检测溶液B 以及96 孔板保存于-20oC。
2、使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于
-20oC,避免潮湿。
注意:
试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1 个月内使用完毕。
产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
内β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)ELISA试剂盒标本的采集与保存:
1、血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或4oC 过夜,然后1000×g 离心20 分钟,取上清即
可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30 分钟内于2-8oC 1000×g 离心15 分钟,
取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
3、组织匀浆:
1) 取适量组织块,于预冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后
再匀浆);
2) 可同时选用多种匀浆方法达到较好的破碎效果:首先将组织块移入玻璃匀浆器,加入5-10mL 预冷PBS 进行充
分研磨,该过程需在冰上进行(有条件实验室可选用机器匀浆);得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融
进一步处理(超声破碎过程中注意冰浴降温;反复冻融法可重复2 次)。
3) 将制备好的匀浆液于5000×g 离心5 分钟,留取上清即可检测。
4、细胞裂解液:
1)贴壁细胞需要先用胰酶消化,离心收集细胞(悬浮细胞可直接离心收集);
2)将收集到的细胞用冷PBS 洗3 次;
3)物理方法裂解细胞(可先超声破碎细胞,再反复冻融):
i 超声破碎:取适量PBS 重悬细胞,用一定功率的超声波处理细胞悬液,使细胞急剧震荡破裂。
ii 反复冻融:将待破碎的细胞在-20oC 以下冰冻,室温融解,反复3 次,使细胞溶胀破碎。
4)将标本于2-8oC 1500×g 离心10 分钟,收集上清备用。
5、细胞培养上清或其它生物标本:请1000×g 离心20 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20oC 或-80oC 保
存,但应避免反复冻融。
注意:
1、以上标本均需密封保存,4oC 保存应小于1 周,-20oC 不应超过1 个月,-80oC 不应超过2 个月。
2、标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
3、标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。
内β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)ELISA试剂盒操作步骤:
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1.Add 100 μL of standard or sample to each well. |
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2.Remove the liquid. |
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3.Add 100 μL Biotinylated Detection Ab. Incubate 1 hour at 37℃.Aspirate and wash 3 times. |
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4.Add 100 μL HRP Conjugate. Incubate 30 min at 37℃.Aspirate and wash 5 times. |
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5.Add 90 μL of Substrate Reagent. Incubate for 15 min at 37℃. |
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6.Add 50 μL of Stop Solution. |
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7.Read the OD at 450 nm immediately. Calculation of the results. |
上海淳麦生物是专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的专业性生物科技公司。本着服务科学的理念,赛泓瑞建立了生命科学研究工具的研发、生产、销售及技术服务平台,现已有数万余种产品,并每年不断开发新产品,为广大的生命科学研究人员、医学、药学、农业、环保等的科研人员提供科研工具性产品及技术服务.
经营范围:ELISA试剂盒、原代细胞和细胞株、化学试剂、蛋白、抗体、分子试剂和试剂盒。
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文献和实验大鼠 N- 乙酰 - β -D- 氨基葡萄糖苷酶( NAG ) 酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中N- 乙酰- β-D- 氨基葡萄糖苷酶(NAG ) 的 含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 大鼠 N- 乙酰 - β -D- 氨基葡萄糖苷酶( NAG ) 水平。用纯化的 大鼠 N- 乙酰 - β -D
有吸收峰。用 NaOH 终止酶反应后,黄色可稳定一段时间。 在 ELISA 中应用 AP 系统,其敏感性一般高于应用 HRP 系统,空白值也较低。但由于 AP 较难得到高纯度制剂,稳定性较 HRP 低,价格较 HRP 高,制备酶结合物时得率较 HRP 低等原因,国内在 ELISA 中一般均采用 HRP。 除 HRP 和 AP 以外,在商品 ELISA 试剂中应用的酶尚有葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶和脲酶等。 β-半乳糖苷酸的底物常用 4-甲基伞基-β-D 半乳糖
法检出抗原,血清稀释1:8为阳性。Feldmesset用此法自AIDS患者引发新形隐球菌性脑膜炎的血清中检出抗原而及时诊断。 (六)、深部丝状真菌感染的抗原检查。 丝状真菌的细胞壁成分含(1→3)β-D葡聚糖,可用鲎试剂(鲎凝固酶)检出。以20μg/ml为界限值。文献报告检查41例深部丝状真菌感染者,37例阳性,敏感率90%,特异性100%. 三、检查真菌的特异性酶 白色念珠菌具N-乙酰-β-D半乳糖苷酶和脯氨酸氨肽酶,如用适当底物检测,此两酶同时阳性,即可确定。都柏林念珠菌只具
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