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1000
- 英文名:
FITC-Lysozyme
- CAS号:
N/A
- 保质期:
一年
- 供应商:
深圳市魅罗科技有限公司
- 保存条件:
-20°干燥避光
- 规格:
50mg
荧光素标记溶菌酶 FITC-Lysozyme CY3/CY5/CY5.5/CY7/ICG荧光标记蛋白
关键产品信息
中文名称: 荧光素标记溶菌酶
英文名称 : FITC-Lysozyme
品牌:魅罗科技(MeloPEG)
结构
纯度:95%
注意事项
保持干燥
存储条件
-20℃以下冰冻、干燥
应用
荧光素标记溶菌酶(FITC-Lysozyme) 是一种 通过荧光素异硫氰酸酯(FITC)共价标记溶菌酶的荧光蛋白,保持溶菌酶的抗菌活性并具备绿色荧光,广泛用于细菌裂解、细胞摄取分析和荧光成像研究。
荧光素标记溶菌酶(FITC-Lysozyme)的特性:
荧光特性:发射绿色荧光(激发 495 nm,发射 520 nm),适用于荧光显微镜和流式细胞术(FACS)。
酶活性保持:标记后仍具备裂解细菌细胞壁的能力。
高特异性:选择性作用于含肽聚糖的细菌细胞壁,不影响真核细胞。
稳定性良好:FITC 标记后蛋白仍稳定,可用于长期荧光跟踪研究。
非放射性:相比放射性标记更安全,适用于生物医学研究和活体实验。
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文献和实验当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时,主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合,形成FITC-蛋白质结合物,即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基,一般最多能结合15~20个,一个IgG分子可结合2~8个分子的FITC,其反应式如下FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → FITC-NS-C-N-H2-蛋白质常用Marsshall(1958)法标记荧光抗体,也可以根据条件采用Chadwick等标记法或Clark
(一) 原理 目前用于抗体标记的荧光素主要有异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocynate,FITC)或罗 达明(Lissamine rhodamine B200, RB200)。在硷性条件下FITC的碳酰胺键可与抗体赖氨酸的ε 氨基共价结合,标记后的抗体仍保持与相应抗原结合的能力。在荧光灯源紫外线或兰紫光 激发下产生黄绿色荧光,通过在荧光显微镜下观察或流式细胞仪分析可对相应抗原进行定 性、定位或定量
,易于保存。 常用的标记蛋白质的方法有搅拌法和透析法两种。以fitc标记为例,搅拌标记法为:先将待标记的蛋白质溶液用0.5ml/lph9.0的碳酸盐缓冲液平衡,随后在磁力搅拌下逐滴加入fitc溶液,在室温持续搅拌4~6h后,离心,上清即为标记物。此法适用于标记体积较大,蛋白含量较高的抗体溶液。优点是标记时间短,荧光素用量少。但本法的影响因素多,若操作不当会引起较台强的非特异性荧光染色。 透析法适用于标记样品量少,蛋白含量低的抗体溶液。此法标记比较均匀,非特异染色也较低
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