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- 普诺赛
- CL-1009
- 武汉
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 供应商：
武汉益普生物科技有限公司
- 英文名：
PC-3-GFP
- 规格：
1×10⁶cells/T25培养瓶
| 名称 | PC-3-GFP (人前列腺癌细胞（绿色荧光标记）) (STR鉴定正确) |
| 种属 | 人 |
| 生长特性 | 半贴半悬 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 冻存条件 |
冻存液：55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度：液氮 |
| 培养方案A（默认） |
生长培养基：
Ham's F-12K+10%FBS+1%P/S
培养条件：
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃
|
| 推荐传代比例 | 1:3-1:6 |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 注意事项 | 悬浮与贴壁混合，需要将培养基中的悬浮细胞与消化完成的贴壁细胞一并离心收集再做传代。 |
| 背景描述 | PC-3源于一位62岁白人男性IV级前列腺腺癌患者的骨转移灶；有低水平的酸性磷酸酶活性和5-α-睾酮还原酶活性。药筛：通过慢病毒感染的方式将携带荧光的基因片段整合进细胞基因组，使细胞表达荧光蛋白，在荧光显微镜下可以进行观察，标记后的细胞非常容易进行追踪检测。由于是用慢病毒转染的方式，导致细胞荧光表达量的不确定性，为增强细胞荧光表达量可进行抗性筛选。正常培养过程中定期（一个月2-3次或频率自定）用终浓度4 μg/mL的嘌呤霉素追加筛选，冻存后复苏也建议可以追加筛选一次，不需要培养过程中每天都加药。 |
| 年龄（性别） | 男性；62岁 |
| 组织来源 | 前列腺；骨腺癌转移灶 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 肿瘤类型 | 前列腺癌细胞 |
| 生物安全等级 | BSL-1 |
| 倍增时间 | ~25-50 hours |
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文献和实验【共享】如何检测GFP、GFP、YFP、EYFP、CFP抗体？
以及定位分析。那么该如何检测GFP其他的一些突变体，如EGFP、YFP、EYFP、CFP的表达和定位呢？我们来看一下GFP标签与其它突变体标签的关系。YFP（Yellow Fluorescent Protein）是黄色荧光蛋白，其序列与GFP基本相同。YFP就是把Thr203以Tyr取代，这样的GFP不发出绿色荧光，而发出较长波长的黄色荧光，也就是YFP。因此两者最大的区别则是发射波长了，在其他序列上没有区别。而EGFP是增强型的GFP，发生了双氨基酸取代，Leu（亮氨酸）取代GFP上的Phe64
一、实验目的 1.了解绿色荧光蛋白和共聚焦扫描显微镜在细胞分子生物学中的应用 2.学会使用质膜蛋白的分析软件。 二、带GFP的质膜蛋白分选概述 1．质膜蛋白的跨膜信号 在粗面内质网上合成的蛋白质有两类：分泌蛋白和膜蛋白，分泌蛋白在内质网上合成之后通过多种信号切除后释放到内质网的腔中，进行下游途径的转运。膜蛋白较为复杂，它要靠疏水区滞留在内质网膜上。下面以酵母二价
GFP应该位于VEGF的C端 N端会干扰其分泌信号 影响其分泌 GFP很大 很可能影响VEGF的分泌 如果只是要筛带荧光的细胞 不需要标记VEGF 建议用pIRES2-EGFP非融合载体 要是需要标记的话 可以加小分子tag 比如flag 实在需要荧光标记VEGF的话 把GFP加在C端 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿
