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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
武汉益普生物科技有限公司
- 英文名:
BV2-EGFP
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
| 名称 | BV2-EGFP (小鼠小胶质细胞(绿色荧光标记)) (STR鉴定正确) |
| 种属 | 小鼠 |
| 生长特性 | 半贴半悬 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 冻存条件 |
冻存液:55% 基础培养基+40% FBS+5% DMSO 温度:液氮 |
| 培养方案A(默认) |
生长培养基:
DMEM+10%FBS+1%P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
|
| 推荐传代比例 | 1:2-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 背景描述 | 增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP)是绿色荧光蛋白(GFP)经生物工程改造而来,其发射出的荧光强度比GFP大6倍以上,比GFP更适合作为一种报告基因来研究基因表达、调控、细胞分化及蛋白质在生物体内定位和转运等。BV2-EGFP细胞是通过慢病毒转染的方法在BV2细胞的基础上构建的,能够长期稳定高表达EGFP的稳转细胞株。该细胞株代次低、活性高、状态好,适用于流式细胞术、荧光成像等实验。半药浓度:Puro=1.0 μg/mL。 |
| 年龄(性别) | 雌性;1周 |
| 组织来源 | 脑;胶质瘤 |
| 细胞类型 | 转化细胞系 |
| 生物安全等级 | BSL-2 |

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文献和实验,可以观察荧光。2、做荧光双标,一抗可以同时加,二抗也同时加。但是,两个一抗要不同种属来源,两个二抗用不同的荧光标记。比如说,第一个一抗为鼠抗A(单抗),第二个一抗为兔抗B;第一个二抗为抗鼠IgG(cy2标记,绿色荧光),第二个二抗为抗兔IgG(cy3标记,红色荧光)。在荧光显微镜下观察时,可以在同一个视野分两次激发观察,并分别照相,再将两次照相叠加。这样可以在同一个细胞内,观察抗原A和抗原B的亚细胞定位。3、用转了绿色荧光蛋白的细胞来做另一种荧光检测,不会有什么问题。最好用cy3标记的二抗去染另一
光)、DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光)。其中DiR的红外荧光可穿透细胞和组织,在活体成像中用来示踪。 图3 DiI 标记的外泌体通过静脉注射观察在体内器官的分布情况 J Cereb Blood Flow Metab. 2018 May;38(5):767-779. 图4 DiO 标记的外泌体与 HCT116 细胞共孵育 BMC Cancer. 2018 Jan 6;18(1):47. 图5 DiR 标记的外泌体静脉注射小鼠结肠癌肿瘤模型 J
成纤维细胞生长因子)、EGF(表皮生长因子)均购自Gibco公司 。抗体为:Nestin兔抗鼠多克隆抗体(博士德公司),GFAP单克隆抗体(Sigma公司),β-Ⅲ tubulin 单克隆抗体(Sigma公司),生物素标记山羊抗小鼠IgG(北京中杉生物试剂公司),山羊抗兔Cy3-IgG(博士德公司),DAB(北京中杉生物试剂公司) ,胎牛血清(FBS,杭州四季青生物试剂公司)。仪器:CO2培养箱(Thermo,美国) ,荧光倒置相差显微镜(Olympus IX70,日本)。病毒载体:Ad/EGFP,滴度为2×1011









