- ￥3000
- SAIOS(赛奥斯)
- CL-226m
- 中国,武汉
- 2025年12月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 库存：
999
- 生长状态：
贴壁生长
- 运输方式：
活细胞/冻存
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 物种来源：
小鼠
- 规格：
1×10⁶cells
LLC/RFP小鼠肺癌细胞红色荧光标记
产品编号：CL-226m
一、细胞介绍
Lewis肺癌是一种从C57BL小鼠的肺中建立的细胞系，该细胞带有原发性Lewis肺癌的植入所致的肿瘤，被广泛用作转移的模型，可用于研究癌症化学治疗剂的机制。该细胞通过慢病毒转染的方式携带RFP基因。
二、细胞特性
来源：小鼠肺癌组织
形态：上皮细胞样，贴壁生长
含量：>1x10⁶cells
规格：T25瓶x1（常温运输）/2mL冻存管x2（干冰运输）
用途：本产品仅供实验室研究使用，不可用于动物或人类治疗或诊断用途
注意：每传10代左右，用嘌呤霉素（4ug/mL）巩固一下。
三、完全培养基及冻存液配制
1) 该细胞完全培养基为：DMEM培养基 + 10%FBS + 1%双抗
2) 培养环境：37℃，95% Air，5% CO₂
3) 冻存液：推荐使用非程序无血清细胞冻存液（货号：RC-0102）
四、收货注意事项
1) 收到细胞后，请检查发货培养瓶的状况，若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染，冻存细胞若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落，请拍照后及时与我们联系。
2) 75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，在显微镜下确认细胞生长状态时，最好在低倍镜（4或5X物镜）下进行，能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下，同时给刚收到的细胞拍照，（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 对于贴壁生长的细胞：①静置后显微镜下观察细胞生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。②若细胞汇合度未超过80%，可去除培养瓶中旧液（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中），加入新的完全培养基5mL，放入培养箱中继续培养（若培养瓶为密封瓶盖须拧松瓶盖）。③若细胞汇合度超过80%，请立即传代（若因运输振动脱落的细胞需要离心回收），首次传代，建议 1:2 传代（两个T25）。
细胞培养操作步骤
一、细胞复苏
1. 将含有1mL细胞悬液的冻存管快速放入37℃水浴中，摇晃冻存管加速解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%酒精擦拭冻存管外壁。
2. 将冻存管内容物加入到含有5mL完全培养基的离心管中混合均匀，1000rpm离心5min。
3. 弃去上清液，补加 4-6mL 完全培养基后吹匀，接种于T25培养瓶中，放入培养箱中培养过夜。
4. 第二天换液并检查细胞密度。
注意：在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和佩戴防护面罩，避免冻存管爆炸造成人员伤害。
二、细胞传代：细胞密度达80%～90%，即可进行传代
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化2-3min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后，加 5mL 以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞，完全脱落后吸出至离心管中，1000rpm 离心 5-8min，弃去上清液，补加 1-2mL 完全培养基后吹匀。
4. 按5-6mL/瓶补加完全培养基，将细胞悬液按 1:2 ~ 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中，放入培养箱中培养。（1:2传代表示1个T25培养瓶传2个T25或2个直径为6cm的培养皿）。
三、细胞冻存
收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。步骤如下：
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清，用细胞冻存液重悬细胞，按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞放入-80℃冰箱中，24h后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项：
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全柜内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
| CL-008e | MA-104，MA104，恒河猴肾细胞 |
| CL-010e | UMNSAH/DF-1,鸡胚胎成纤维细胞 |
| CL-011e | OAR-L1,绵羊肺成纤维细胞 |
| CL-012e | CHO 仓鼠卵巢细胞 |
| CL-013e | Duck embryo永生化鸭胚成纤维细胞 |
| CL-014e | BHK-21，BHK21（仓鼠肾成纤维细胞） |
| CL-015e | CHL 中国仓鼠肺细胞 |
| CL-016e | CHO-S,仓鼠卵巢细胞 |
| CL-017e | LEC-1,LEC1,仓鼠卵巢细胞 |
| CL-018e | PT-K75,猪鼻甲黏膜成纤维细胞 |
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