DU4475 人乳腺上皮细胞

DU4475 人乳腺上皮细胞

产品编号：CL-617h

细胞介绍

从一名 62 岁女性的未分化癌的局部转移性皮肤结节建立，该癌在低分化乳腺导管癌的根治性乳房切除术后 7 年发展；文献中描述的细胞很容易在无胸腺裸鼠体内生长并产生肿瘤，从中可以将细胞引入体外培养；据报道，细胞表达乳脂肪球的成分，并且呈三阴性。

细胞特性

来源：白人 女性 胸部; 乳腺

形态：悬浮生长 多细胞聚集体

含量：>1x10⁶cells

规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

用途：仅供科研使用

细胞运输、保存及注意事项

	复苏细胞	冻存细胞
包装	充液的T25细胞培养瓶	1mL冻存管
运输条件	常温	干冰
保存方式	75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒温细胞培养箱	-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏
注意事项	①　收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们； ②　请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照，10X和20X各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据； ③　半贴细胞或贴壁不牢（悬浮）细胞：T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h，显微镜下观察细胞的情况，若细胞密度在60%以下，客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养，若细胞生长70%-90%对细胞进行传代，传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收； ④　运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶 1：2传代。

培养基及培养冻存条件准备：

完全培养基	1640培养基+优质胎牛血清，10%+ 双抗1%
培养条件	气相：空气，95%；二氧化碳，5%；温度：37℃；培养箱湿度为70%-80%
冻存液	90%血清 + 10%DMSO，现用现配

 

 

细胞复苏、传代、冻存操作

（一）细胞复苏

①　新制 100mm 平皿 1个，含 12mL 上述培养液；

②　冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入安全柜复苏；

③　用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；

④　放入（37℃，5%CO2）培养箱中，过夜换液，2-4天长满。

注意：建议复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩，避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸造成人员伤害。

（二）细胞传代

悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

（三）细胞冻存:

冻存则用3mL冻存液（90% FBS+ 10% DMSO）终止消化，吹打均匀，分为3支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存。

注意事项

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。