- ￥2500
- IMMOCELL
- 厦门
- IM-H621
- 2026年01月23日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
KYSE-140
- 库存：
999
- 供应商：
厦门逸漠生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
详询
- 细胞类型：
详询
- 品系：
详询
- 组织来源：
食管
- 相关疾病：
详询
- 物种来源：
人源
- 免疫类型：
详询
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞：
详询
- 器官来源：
人源
- 运输方式：
常温T25瓶运输或冻存发货
- 年限：
长期
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
1x106cells/T25或1mL冻存管
KYSE140人食管鳞癌细胞产品基本信息
细胞名称：KYSE140 ，人食管鳞癌细胞
种属来源：人
组织来源：食管鳞癌
细胞形态：上皮细胞样 有堆积倾向
生长特性：贴壁细胞
培养基:：RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳;温度：37℃
传代方法：1:2至1:3，每周 2-3次
冻存条件：无血清细胞冻存液，液氮储存
支原体检测：无
KYSE140人食管鳞癌细胞培养操作
KYSE140人食管鳞癌细胞复苏步骤
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中，加入约4 mL完全培养基，培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
KYSE140人食管鳞癌细胞传代步骤
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加入0.25%Trypsin-0.02% EDTA消化液于培养瓶中(T25瓶1-2ml，T75瓶2-3ml)，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化3-5min(难消化的细胞可以适当延长消化时间)，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加3-4ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含6-8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。
KYSE140人食管鳞癌细胞冻存步骤
待KYSE140细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
KYSE140人食管鳞癌细胞培养注意事项
1. 收到KYSE140细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解KYSE140细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正常现象。.观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
6.该KYSE140细胞仅供科研使用。
7. 说备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议1：2传代 。
8. 注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。
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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识，因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……，这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
、 miRNA靶基因的验证与miRNA靶基因 的预测方法相比，对miRNA靶基因进行实验验证的方法并不多，目前还没有一个快速、简便、高通量的鉴定方法。最直接的鉴定方法是， 利用荧光定量PCR及Westernblot方法分别检测转染或敲低miRNA后细胞中mRNA水平及蛋白水平的变化，从而确定miRNA与靶基因的对应关系。这种方法能够直接鉴定出miRNA的靶基因， 准确度高但不能鉴定miRNA的靶位点。转染或敲低miRNA：方式主要有两种，一种是构建miRNA过表达载体的稳定表达系统，一种是人工合成miRNA
关于如何鉴定收到的新细胞是否有污染，很多站友，特别是新接触细胞培养的站友通常没有太多经验，在此我分享下我这边接收到新细胞后是如何判断是否有污染的。一、肉眼观察以下几项：1. 细胞瓶身：如果瓶身上没有裂缝，正常；如果瓶身上有裂缝，则污染几率非常大。2. 培养基颜色：如果培养基颜色是红色或者粉色，正常；如果是橙色，则可能是污染或者细胞过密；如果是黄色，则污染几率非常大。3. 培养基澄清度：如果培养基澄清，正常；如果有少许漂浮物，则可能是污染或者有细胞凋亡；如果培养基很浑浊，甚至出现絮状物，则污染
