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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年,曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员,负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
美国GENMED品牌主营业务包括有:细胞培养(Cell Culture)试剂技术、分子技术、蛋白化学技术、免疫抗体技术、医学技术、生物化学技术、模式生物技术、微生物技术、植物技术、载体技术、毒理技术、营养技术、平台技术、生物分类学(taxonomy)分析技术等20余项,详细的项目可以咨询在线客服!
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文献和实验的动态范围或线性度最佳,可确保基因表达定量的准确性。 所选试剂在扩增过程中应产生较高且一致的 cDNA 得率,以获得具有高灵敏度和低变异性的基因表达结果。可考虑预混液形式的逆转录酶用以可以减少实验误差。 RT-qPCR 的一个特殊程序是从未经 RNA 分离的粗细胞裂解物直接进行逆转录。在使用稀缺样本或选用群体内特定细胞的实验,可考虑使用直接 RT-qPCR 法来防止可能的样本损失和低 RNA 回收。 cDNA 克隆和文库构建 cDNA 文库可由代表特定样本中转录序列的 cDNA 克隆组成
又称 RNA指导的 DNA聚合酶。是以 RNA为模板合成 DNA的酶。这种酶是 1970年美国科学家特明( H.M.Temin)和巴尔的摩( D.Baltimore)分别于动物致癌 RNA病毒中发现的,他们并因此获得 1975年度诺贝尔生理学或医学奖。当 RNA致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒( Rous sar-coma virus)进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒 RNA互补的 DNA单链,继而复制出双螺旋 DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色
,此时则需要通过优化引物的设计来减少引物二聚体对结果的影响。 无逆转录酶对照 No Reverse-Transcriptase Control, No RT 当进行 RNA 定量实验时,如果引物和探针设计在同一个外显子上,就无法从结果中判断扩增是否来源于未去除干净的 DNA,从而影响定量结果的准确性。除了在引物和探针设计上面下功夫,还可以设置无逆转录酶对照。即在逆转录实验时,不加逆转录酶,并进行后续的定量 PCR 检测。无逆转录对照中由于没有 cDNA,DNA 聚合酶无法扩增 mRNA,则不应
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