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深圳顺辰生物技术有限公司
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仅供科研研究、实验使用
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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年,曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员,负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
美国GENMED品牌主营业务包括有:细胞培养(Cell Culture)试剂技术、分子技术、蛋白化学技术、免疫抗体技术、医学技术、生物化学技术、模式生物技术、微生物技术、植物技术、载体技术、毒理技术、营养技术、平台技术、生物分类学(taxonomy)分析技术等20余项,详细的项目可以咨询在线客服!
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文献和实验成固体 图4 随着研钵的温度回复到室温,Trizol试剂逐步又变为液体 4、把此Trizol试剂转移到玻璃匀浆器中,再进一步匀浆3-5min(图5)。 图5 Trizol试剂转移到玻璃匀浆器中,再进一步匀浆5、再把Trizol试剂转移到1.5ml离心管中(图6),后续可以按照Trizol试剂的标准操作抽提总RNA。也可以把此Trizol试剂保存在生物冰(低于15℃即可)邮寄给我们,由我们来完成后续的抽提过程。 图6 把Trizol试剂转移到1.5ml的离心管中 说明: 1、研磨
冻融来破碎细胞。 注:细胞破碎好以后取出部分匀浆液显微镜观察,如细胞还未破碎则延长匀浆时间。生化实验一般不推荐用裂解液进行样本处理。 四、细胞培养基的收集和处理 直接取细胞上清进行检测,如有浑浊,4°C,3000×g离心10 min,取上清置于冰上待测。 五、体液样本的收集和处理 1. 唾液样本 用清水漱口,30 min后用唾液采集器收集唾液,4℃,10000×g离心15 min,取上清置于冰上待测。 2. 尿液样本 收集新鲜尿液,4℃,10000×g离心15 min,取上清置于冰上待测。 3. 胸水
细胞可以省略该步骤。 2) 将细胞悬浮液收集到离心管中,在2-8℃下以1000×g离心5分钟,然后吸去培养基,用预冷PBS洗涤细胞3次。 3) 加入适量的预冷PBS(建议在使用前立即加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞。在6孔培养板(约1×106个细胞)中,每个孔加入150-250μL的PBS来重悬细胞。 4) 使样本在-20℃或-80℃条件和室温条件下反复冻融,重复冻融过程数次,直至细胞完全裂解。也可以使用超声波细胞破碎器超声处理悬浮液来裂解细胞。 5) 2-8℃下以1500×g离心10分钟,去除细胞碎片,收集
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