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深圳顺辰生物技术有限公司
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仅供科研研究、实验使用
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美国GENMED品牌产品由国际优秀留美博士团队创建的生物医药科技企业。公司总部位于美国生物医药之谷波士顿地区。公司创办人在美国深造、研究、工作和创业十三余年,曾任美国哥伦比亚大学肿瘤遗传研究院的研究员,负责主持美国卫生部、农业部和能源部的多项重大科技项目。
美国GENMED品牌主营业务包括有:细胞培养(Cell Culture)试剂技术、分子技术、蛋白化学技术、免疫抗体技术、医学技术、生物化学技术、模式生物技术、微生物技术、植物技术、载体技术、毒理技术、营养技术、平台技术、生物分类学(taxonomy)分析技术等20余项,详细的项目可以咨询在线客服!
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文献和实验前先混匀,并且室温(20-25℃)放置10分钟,从而消除可能发生的探针和蛋白的非特异性结合,或者让冷探针优先反应。然后加入标记好的探针,混匀,室温(20-25℃)放置20分钟。 (3) 加入1微升EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(无色,10X),混匀后立即上样。注意:有些时候溴酚蓝会影响蛋白和DNA的结合,建 议尽量使用无色的EMSA/Gel-Shift上样缓冲液。如果对于使用无色上样缓冲液在上样时感觉到无法上样,可以在无色上样缓冲液里面添加极少量的蓝色的上样缓冲液,至能观察到蓝颜色即可
nitrogen中研磨成粉末,加入Tris-HCL缓冲液(50mm,8.8,Tris-HCL, 5mmEDTA,20mmDTT,100mmKCL,2mmPMSF),在融化后,混合液在4度放30min, 25000g离心20min,收集上清,对沉淀重新提取一次,将收集到的上清混合,用5倍体积的100%丙酮沉淀蛋白质,-20度孵育2h,离心后,用80%的丙酮洗剂沉淀2次,IEF buffer重悬沉淀,方法如1 利用Bradford试剂法估测提取的总蛋白浓度,并调整浓度行蛋白电泳,-80度保存。 个人
目 录 概述... 1 手册的概述... 1 双向(2-D)电泳概述... 1 手册中使用的标记符号... 2 第一向等电聚焦(IEF)的仪器选择... 3 第二向SDS-PAGE电泳设备的选择... 4 仪器的选择... 6 等电聚焦系统的选择... 6 第二向电泳的设备选择... 8 MultiphorII平板型设备... 8 垂直系统... 9 实验室技术... 9 第一章... 11 样品制备... 11 1.0 样品制备——一般策略... 11
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