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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温,24个月
- 保质期:
室温,24个月
- 英文名:
磷酸缓冲盐粉剂(1×PBS,无钙镁)
- 库存:
999
- 供应商:
麦格生物
- 规格:
2L
注意事项:主要由137mM NaCl, 2.68mM KCl, 8.1mM Na2HPO4,1.47mM KH2PO4组成,该粉剂溶于水后pH值为7.4。
储运及效期:室温,24个月
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文献和实验相关专题 因为钙离子和镁离子会影响胰酶的消化能力,导致胰酶消化能力下降,培养细胞时,消化的细胞数量有限,加上细胞的密度依赖性,所以细胞培养时最好使用不含有钙镁离子的PBS 缓冲液。
悬液(4步骤处理过的细胞悬液)于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞。在荧光显微镜下用双色滤光片观察。 B.贴壁细胞 一、流式细胞仪检测 按照实验方案进行凋亡诱导,将培养基吸出转移至干净离心管内(待用),用无钙、镁离子的PBS清洗培养瓶细胞一次。 培养瓶中加入适量的胰酶消化细胞,室温孵育至轻轻吹打可使贴壁细胞脱落,吸除胰酶消化液,避免胰酶消化过度。 注意:对于贴壁细胞,胰酶消化步骤很关键。胰酶消化时间如果过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,从而导致细胞坏死的假阳性;消化时间如果过长,同样
的 PBS)离心洗涤 1~2 次; 若悬液中有明显的沉淀块,需用 200~300 目的滤网过滤后再用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)洗涤 1~2 次; 用细胞染色 buffer(或含 1%BSA 的 PBS)调整浓度至 1x107/mL 备用。 六、贴壁细胞的制备 吸除培养基上清液,用含无钙、镁离子的PBS漂洗一次; 以 25 mL 培养基为例,加入 1 mL 消化液(0.1%胰蛋白酶),置室温(25℃)或 37℃ 消化 2~5 min;或者加入 1 mL 的 EDTA
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