
基因敲入细胞系定制服务
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- 2025年07月08日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商:
谛科生物
- 服务名称:
基因敲入细胞系定制服务
1)我司使用无痕的敲入模式(除目标片段外,无外源基因整合)开展基因敲入编辑工作,能够大程度上反应细胞敲入后的真实状态。
2)我司基因敲入服务高度定制化,真人技术顾问可及时专业的解答客户的问题。
3)对于>20bp以上的基因敲入服务,因技术难度大,若经2轮试验仍无法获得成功,需收取已发生的试剂成本费用,并讨论是否还需进一步尝试。
服务价格:
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内容 |
价格 |
周期 |
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标准服务 |
1)客供细胞质控 2)基因敲入服务 3)交付细胞质控 |
500000元 |
4~6周 周期波动受到细胞增殖速度影响 |
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附加服务 |
项目附加费用 |
评估后反馈(0元起) 主要取决于细胞培养的难易程度,以及培养过程是否需要我司自行采购附加试剂。 | |
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mRNA水平验证 |
1000元 |
1~2周 | |
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蛋白水平验证(不含1抗) 分组:敲入前/敲入后 |
2000元 |
1~2周 | |
服务标准:
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客户需提供 |
项目交付 |
交付周期 |
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标准服务 |
敲入序列 敲入位置 填写的宿主细胞评估表 |
基因敲入细胞株 项目相关的CofA文件 测序结果 |
3~4月 受限于细胞生长速度的细胞需要评估。 |
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附加服务 |
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敲入细胞株mRNA水平验证 |
1-2周 |
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Western blot/FACS抗体 |
敲入细胞株目标蛋白水平验证 |
1-2周 |
*注:一般由客户提供宿主细胞系,如果需要由我司提供宿主细胞系,需要额外收费。
*如果宿主细胞使用的是常规培养基,如:RPM1640、DMEM、MEM等无需客户提供,如果是特殊培养基及添加物,需要客户提供。
服务流程:
1:细胞情况评估:填写细胞信息评估表
2:敲入片段评估:根据客户的项目需求(敲入片段及敲入位置)评估敲入对细胞增殖的潜在影响与风险,评估项目实施的难易程度。
3:基因片段敲入方案确认:根据客户需求设计基因敲入方案并提交PDF文件由客户确认。
4:基因编辑物料合成(根据项目方案合成gRNA,同源重组模板Doner),目的细胞预培养及质检(根据合同检测细胞支原体污染情况,种属,待编辑区序列与参考序列是否一致)
5:基因编辑物料递送至目的细胞,构建pool。根据方案具体需求使用脂质体/电转的方式进行递送。
6:pool细胞测序:验证是否有符合项目要求的插入突变,若存在预期插入突变则继续实验,反之重新开展1轮递送,若两轮递送后均不符合预期则与客户协商调整方案或终止项目服务;
7:从pool细胞中挑取并培养细胞克隆
8:细胞克隆测序鉴定
9:符合项目要求的细胞克隆扩大培养
10:待交付细胞质检(支原体检测)
11:细胞交付:根据客户的需求交付在培细胞,或者冻存细胞。
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文献和实验移植动物模型肿瘤生长及转移速度较快,可用来评价乳腺癌发生发展及转移过程中免疫应答的作用。异种移植一般采用人源组织或细胞接种于免疫缺陷小鼠(如重度免疫缺陷鼠 NCG),能模拟人恶性肿瘤成瘤后过程,可用于基础和临床研究。但人乳腺癌存在不同的分子分型,且人乳腺癌细胞系相对于其他癌种成瘤难度更大,且不稳定,因此选择合适的细胞系也十分重要。针对乳腺癌不同的分子分型,集萃药康细胞资源库配备丰富的乳腺癌细胞株以及热门靶点人源化改造的细胞资源,用于构建乳腺癌移植瘤模型。 表 1. 部分集萃药康乳腺癌细胞资源展示
TALEN和CRISPR/Cas9作为现代分子生物学技术上的一次革新,它结合了转基因技术简便快速,没有物种限制及ES细胞基因打靶技术精准的优点,在短短的几年时间里便受到广大科研人员的青睐。但由于其脱靶效应至今无法避免,且难以胜任大片段的基因敲入,所以还远远谈不上成熟。如何提高TALEN和CRISPR/Cas9的效率和降低脱靶效应将是未来的主要研究方向。基于同源重组的ES打靶是基因敲除的业内金标准,它通过同源重组技术将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造基因组某一基因的目的
【原创】基因组编辑三大工具ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9筛选基因敲除细胞系阳性克隆Protocol
shRNA),都是在一定的特殊历史时期或者科学家经费有限情况下的特殊时期的“无奈”选择。那个年代获得基因修饰动物及饲养动物成本要肯定远远比培养细胞高多了。 8. RNAi技术所在的一个特殊历史阶段,科学家无法很快及较低成本做到细胞系或小鼠个体水皮上的彻底敲除,只能退而求其次,实现在细胞或小鼠上敲低,再辅以其他数据与严格对着呼应。 9. 如果土豪您有能力,请告诉我们您的心声,截止2014年获得CRISPER-Cas9基因敲除、基因敲入、基因条件性敲除、多基因、基因大片段(如两个,三个、甚至更多)敲除的小鼠
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