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雨蛙素+DBTC诱导慢性胰腺炎模型构建

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  • 2026年02月17日
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    1. 动物选择与准备

    • 物种:常用大鼠(如Wistar或SD品系),成年雄性,体重200-250g。
    • 饲养条件:SPF级环境,适应性喂养1周,自由饮食饮水。

    2. DBTC造模步骤

    • DBTC配制:将DBTC溶于无水乙醇与甘油混合液(体积比2:3),终浓度按需调整(如7mg/kg)。
    • 给药方式:通过尾静脉注射单次给药,剂量为5-8mg/kg(常用7mg/kg)。
    • 作用机制:DBTC选择性损伤胰腺导管上皮细胞,引发炎症反应和纤维化。

    3. 雨蛙素联合诱导步骤

    • 雨蛙素配制:溶于生理盐水,浓度按需调整(如50μg/kg)。
    • 给药方式:DBTC注射后第2天开始,腹腔注射雨蛙素50μg/kg/次,间隔1小时,连续注射4-7次(根据模型严重程度调整)。
    • 协同机制:雨蛙素通过过度刺激腺泡细胞分泌,加重胰腺自消化和炎症反应;DBTC破坏导管系统,两者协同加速纤维化进程。

    4. 模型评估时间点

    • 急性期:DBTC注射后3-7天,出现胰腺水肿和炎细胞浸润。
    • 慢性期:DBTC注射后4-6周,胰腺组织呈现明显纤维化、腺泡萎缩和导管扩张。

    5. 关键观察指标

    1. 血清学检测:淀粉酶、脂肪酶水平(急性期升高,慢性期可能下降)。
    2. 组织病理学
      • HE染色:炎细胞浸润、腺泡坏死、纤维组织增生。
      • Masson染色:胶原沉积量化纤维化程度。
    3. 分子标志物:TGF-β1、α-SMA(纤维化标志物),IL-6、TNF-α(炎症因子)。

    6. 注意事项

    • DBTC毒性:需精确控制剂量,尾静脉注射速度宜慢,避免肺栓塞(致死率约30%)。
    • 雨蛙素优化:可调整注射次数(如4次诱导水肿性胰腺炎,7次诱导坏死性病变)。
    • 模型稳定性:联合模型较单一诱导法更接近人类慢性胰腺炎病理特征,但需注意动物个体差异。

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