DSS诱导溃疡性结肠炎模型构建

一、动物选择与准备

1. 常用动物：小鼠（C57BL/6、BALB/c等品系）、大鼠、斑马鱼、果蝇等，以小鼠为主。
2. 年龄与性别：6-8周龄成年小鼠，雌性或雄性均可（文献多采用雌性以降低激素干扰）。
3. 饲养条件：SPF环境，适应性饲养1-2周，自由饮食。

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二、DSS溶液配置

1. 浓度范围：
   • 急性模型：2-5%（常用3-5%）。
   • 慢性模型：1-3%（常用2-3%）。
2. 配制方法：按质量体积比（w/v）溶于饮用水，如配制3%溶液即3g DSS溶于100ml水，0.22μm滤膜过滤除菌。
3. 更换频率：每2-3天更换新鲜DSS溶液，避免微生物污染。

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三、急性结肠炎模型构建

1. 操作步骤：
   • Day 1：标记动物，开始自由饮用DSS溶液（如3-5%）。
   • 持续周期：连续饮用5-7天。
   • 终止处理：第7天处死动物，观察结肠长度、病理变化。
2. 观察指标：
   • 体重下降（5-20%）、血便、腹泻、活动减少。
   • 结肠缩短（显著长度减少）、黏膜充血水肿。

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四、慢性结肠炎模型构建

1. 操作步骤（以多周期循环为例）：
   • 周期1：自由饮用2-3% DSS溶液5-7天。
   • 恢复期：改饮正常水7-14天。
   • 重复周期：重复DSS给药和恢复期2-4次（总时长4-8周）。
2. 特征：
   • 组织学改变：隐窝结构破坏、杯状细胞缺失、黏膜下层纤维化。
   • 炎症反复：症状较急性模型轻但持续。

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五、模型评估方法

1. 疾病活动指数（DAI）评分：
   • 体重下降（0-4分）、粪便性状（0-4分）、便血程度（0-4分）。
   • 总分范围：0-12分，≥3分提示成功造模。
2. 病理学分析：
   • 结肠长度：造模后结肠显著缩短。
   • H&E染色：观察黏膜糜烂、隐窝脓肿、炎性细胞浸润。
   • 评分标准：基于溃疡数量、炎症深度和范围（0-12分）。

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六、关键注意事项

1. 预实验调整：首次实验建议从3%浓度开始，根据动物反应增减0.5%。
2. 批次差异：不同批次DSS分子量（36-50kDa）可能影响效果，建议使用同一批次。
3. 动物品系差异：C57BL/6对DSS更敏感，BALB/c需稍高浓度。
4. 联合模型：与AOM联用可构建结肠炎相关癌症（CAC）模型。

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七、常见问题与优化

• 症状差异：同一笼动物因饮水量或耐受性不同可能出现个体差异。
• 小肠出血：浓度过高时可能发生，可降低DSS浓度或缩短给药时间。
• 慢性模型耐受性：后续周期症状可能减弱，需延长给药时间或提高浓度。