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- BHcell（博辉生物）
- F786
- 2025年07月14日
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2ug
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文献和实验【求助】启动子片断插入到了pgl3basic载体中，为什么没有检测到荧光？参与者：smile1688我把一个基因的启动子片断插入到了pgl3basic载体中，但是却没有测到荧光。阳性对照，即Pgl3 control检测到荧光。推测：1、启动子片断错误。1000bp，已测序验证，在ATG前40bp，推测离转录起始位点还有200bp以上。2、细胞的转录效率太低。但是Pgl3 control和TK值都在10万以上。3、细胞内的因子没有启动启动子活性。启动子和转染的细胞不是同一个物种，但是大家好
问：最近要做萤光素酶载体PGL3转染细胞，PGL3载体上面带有neo的抗性标记，有一个老师和我说要培养基里面要加G418筛选，但我查了一些PGL3载体转染的文献，都没有提到加G418，所以想问问学长们到底要不要加G418？答：Neo是一个抗性基因，pGL3系列的载体上有这个抗性基因；Neo在原核（大肠杆菌）中表达的是Kan抗性；在真菌（链霉）中表达的是新霉素抗性；而在真核（细胞、酵母）中表达的则是G418抗性；不知LZ实验目的是什么，若是要筛稳定转染的细胞株的话，则需要加G418，用于筛选
相关专题 总有一种转染方法适合你 问：最近要做萤光素酶载体PGL3转染 细胞，PGL3载体上面带有neo的抗性标记，有一个老师和我说要培养基里面要加G418筛选，但我查了一些PGL3载体转染的文献，都没有提到加G418，所以想问问学长们到底要不要加G418? 答：Neo是一个抗性基因，pGL3系列的载体上有这个抗性基因;Neo在原核(大肠杆菌)中表达的是Kan抗性;在真菌(链霉)中表达的是新霉素抗性;而在真核(细胞、酵母
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