- $216
- LSM BIO
- 进口
- PVT66404
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
负20摄氏度
- 保质期：
3个月
- 英文名：
pLV3-U6-IRF2BPL-sgRNA3-Cas9-Puro Plasmid
- 库存：
100
- 供应商：
LSM BIO
- 规格：
2ug
pLV3-U6-IRF2BPL-sgRNA3-Cas9-Puro Plasmid
Catalog No.: PVT66404
pLV3-U6-IRF2BPL-sgRNA3-Cas9-Puro Plasmid
Alias:
Host: Mammalian cells,lentivirus
Use(s): gene edit
Fragment Type: CRISPR
Fragmented species: Human
Prokaryotic resistance: Amp
Screening Markers: Puro
Fluorescence labeling:
Promoter: U6
Competent cells: Stbl3
Temperature: 37Celsius
Caution:
1. This product is FOR RESEARCH USE ONLY!
2. The item is lyophilized form, Please take the powder plasmid by centrifugation at 5000rpm/min for 1min. Add 20μl ddH2O in to the tube of plasmid.Take 2ul plasmid into 100 μ L corresponding competent cell, centrifugal then full coating on plate.
3. Shipping temperature is 2-8 degrees centigrade.
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文献和实验的表达质粒。A）PCR 扩增的方法U6：来源于人 U6 小核启动子，常用小 RNA 表达，转录本为 shRNA。将 sgRNA 放到 U6 后面，利用 U6 的启动来扩增 sgRNA。将这部分内容整合到 Cas9 expression plasmid pSpCas9（Cas9 表达质粒）中，一起共转。B）sgRNA 表达质粒的方法现在我要用这个方法来举例设计 p53 引物找到包括 sgRNA 序列的前后 1000 个碱基的序列（2000 bp）找到的序列如下：将上面复制的序列粘贴到 blast 中
and homologous recombination. These tools provide researchers with new instruments that accelerateboth forward and reverse genetics efforts. Key words Genome engineering , Cas9 , CRISPR , CRISPR-Cas9 , PAM , Guide RNA , sgRNA , DNA cleavage , Mutagenesis
CRISPR/Cas9 系统作为细菌和古细菌的获得性免疫系统， 通过 RNA 介导特异性的切割外源遗传物质， 用以对抗入侵的病毒和质粒。利用 Cas9 来摧毁入侵 DNA 的 Type Ⅱ CRISPR/Cas 系统， 可以在体外进行基因的编辑。为了提高CRISPR/Cas9 的特异性，使用 Cas9 切口酶和一对 sgRNA，两个相近的切口造成 DNA 双链断裂， 诱导细胞发生非同源末端连接修复， 造成目的基因的突变。利用 CRISPR/Cas9 进行基因的编辑，首先要构建有效的 sgRNA
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