pSilencer 4.1-CMV neo质粒

【求助】pFLAG-CMV2中pFLAG是什么意思？

ssair 各位，请问质粒pFLAG-CMV2中的pFLAG是什么意思？ hyjtb 如果没有估计错的话，应该是从一种有鞭毛的菌中提取出来的治理改造过的载体，如果有谁知道得更确切，指点一下大家。。赫赫。。 zhujoker 只是载体上的一个标签，可以用于构建融合蛋白，以便于检测抗体不好的蛋白。 yabxxh 严重同意版主的签名 本文由丁香

【求助】质粒转染细胞，western鉴定不行，求助

的基因可能有启动子喜好，一般情况下CMV启动子就可以了，如果不行可以试一下E2F1,AP-1等别的启动子的载体，希望建议对你有用。 whm5869 pharmaceutic wrote: 以前我站构建质粒的时候也遇到过这种问题，最后换了一个载体以后就表达了。最后分析认为不同的基因可能有启动子喜好，一般情况下CMV启动子就可以了，如果不行可以试一下E2F1,AP-1等别的启动子的载体，希望建议对你有用。

【求助】求可以用Sal酶切位点重新构建的质粒

就可以了。 如果我找到个质粒，将这个基因连上去之后，怎么才能鉴别/筛选目的基因正反向的问题 你可以根据质粒图谱看，定向将启动子CMV后 将基因定向克隆进去，利用酶切反应及连接的特异性。 ps： 感觉你对自己的实验目的都不是很清楚，这很危险！宁可不做，就怕费力不讨好！ bigbang_0_0 用pEGFP质粒，很适合GFP标签的蛋白的表达； 如果做稳定转染，需要用G418筛选标记 (neo r)