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文献和实验水仙子2005 我想分别构建FOXO1 和 SIRT1基因启动子/luciferase报告质粒,用于研究X基因是否能够调控这两个启动子。但是不知道该扩增两个基因启动子区域的哪一段插入pGL3(promega)中。 另外,promega的pGL3有pGL3-basic和pGL3-enhancer,该选择哪个? 水仙子2005 继续求助 sxd5266 pGL3-basic 没有SV
我也在做这样一条信号通路,NFkB信号通路有商品化的报告基因,promega有,便宜一点的话,国内的碧云天也有,买来直接用就可以了!也可以在下游再找一个具体的基因,克隆启动子,装到pGL3-basic中测,作为补充数据。 非常感谢楼上的回复!我已经购买了promega的NFkb的报告基因,但是因为没有做过类似的实验,想请教:Promega的报告基因是基于NFkb结合的一段保守序列构建的重组质粒,是不是NFkb调控的所有下游基因都具有这样一致性的结合
riset 看了一些文献,常用的荧光素酶质粒是pGL3,但是这个质粒图谱上,荧光素酶下游只有一个XbaI的酶切位点,不是多克隆位点,请问是如何解决克隆片段顺序问题的。谢谢。 shilei5794749 用你序列的特异上游引物和RVprimer4,正向连进去菌P能扩出条带;反向连进去的扩不出条带。 riset 多谢指教,另外再问下,UTR一般都比较长,不能全部克隆,一般克隆多长合适
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