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- 2025年07月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
MAEC
- 库存：
80
- 供应商：
深圳子科生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
详见说明书
- 细胞类型：
科研实验细胞
- 品系：
详见说明书
- 组织来源：
详见说明书
- 相关疾病：
详见说明书
- 物种来源：
小鼠
- 免疫类型：
详见说明书
- 细胞形态：
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 器官来源：
人
- 运输方式：
干冰或者冰袋发货
- 年限：
3年内
- 生长状态：
详见说明书
- 规格：
冻存管；T25培养瓶
复苏步骤：
①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；
②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。
③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。
细胞传代：
①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；
②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。
③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；
④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。
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文献和实验钝性分离胸腺暴露主动脉弓及分支，把主动脉弓、头臂干及左颈总动脉之间筋膜撕开小口，用穿线器穿线。结扎缩窄主动脉弓，其原理是将升主动脉或腹主动脉与24留置针头捆绑在一起造成主动脉狭窄。主动脉弓缩窄是一个慢性心室肥大的最为常用疾病模型，可用于模拟高血压或室内压增高而引起的肥厚性心肌病。此类方法制作心衰模型对技术要求比较高，操作时应当注意，不要破坏动脉血管，容易引起大出血导致造模失败。
酶消化传代。 5、内皮细胞鉴定：相差显微镜下,细胞呈单层铺路石状;免疫组化证明有vWF相关抗原存在。 6、注意事项:将分离出来的主动脉热处理时温度以60℃2秒为宜,太低则成纤维细胞多,太高或时间久则内皮细胞迁出减少。
实验材料： 1. 正常大兔主动脉； 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素，pH7.2； 3. 培养用液：M199培养液（含20%小牛血清）；0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA（1:1，V：V）混合消化液；D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素； 4. 培养器具：培养瓶或皿、白内障、眼科剪、镊子等； 培养方法： 1． 将动物主动脉取出
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