改良Page髓鞘染色液，RC61337-4×50ml

　DNA及寡核苷酸探针在原位杂交组织化学中的应用

链，迅置于冰上冷却。然后置于37℃～42℃杂交过夜。（2）RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景，因此，在操作步骤中省略此步。 （一）地高辛-碱性磷酸酶（Dig -AKP）标记DNA探针在石蜡包埋切片检测病毒DNA中的应用 1．组织前处理 （1）固定：组织以10%中性福尔马林液或Bouins液固定，常规石蜡包埋，切片厚4～6μm，粘附于涂有粘附剂的玻片上，入烤箱60～80℃6～8h，使切片更紧贴玻片。 　　（2）脱蜡：二甲苯10min ×2，自100%乙醇，90

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

：蛋白质样本和生物素标记的蛋白marker标准经SDS-PAGE后转于印迹膜上，然后经一抗→HRP 标记的二抗→HRP催化LumiGLO试剂发生反应并产生荧光→显影于X-光片上。其基本原理如下图： 3.1 主要试剂配制 10×转移缓冲液(transfer buffer)：30.3 gTris-Base，144.1 g Glycine，500 ml三蒸水，振荡混匀后，定容至1000 ml，4℃备用。用时用0.1 M磷酸缓冲液即1×PBS和甲醇稀释至1倍，使甲醇的终浓度

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量（垂直板型电泳）（图）

的，可以用SDS-凝胶电泳法测定其分子量。 SDS-PAGE有连续体系及不连续体系两种，这两种体系有各自的样品溶解液及缓冲液，但加样方式，电泳过程及固定、染色与脱色方法完全相同。三、器材与试剂： 1．器材： ①夹心式垂直板电泳槽，凝胶模（135×100×1.5mm）（北京六一仪器厂）　　②直流稳压电源（电压300～600V，电流50～100mA）　　③吸量管（1，5，10ml）              　　④烧杯（25，50，100ml）　　⑤细长头的滴管