SDS-PAGE下层胶预混液(8%)，RC62316-250

手把手教你跑的一手好胶

，室温保存。脱色液在 90 ml 甲醇：水（体积比 1:1）和 10 ml 冰乙酸混合液用 0.45/0.22um 的膜抽滤，室温保存。1X Tris - 甘氨酸电泳缓冲液 （即 Running buffer）25 mmol/L Tris250 mmol/L 甘氨酸0.1%（m/V）SDS同样可以扩大配方为 5X 的储存液。30％ 丙烯酰胺混合液（100 ml）29.2 g 丙烯酰胺（Acr）0.8 g 亚甲基双丙烯酰胺（Bis）10 g SDS 外包锡纸，4℃ 冰箱保存二、制胶选择胶板（0.75

干货：小分子量蛋白（11KD）WB实验艰辛历程及经验总结

泳吧。4、在我用SDS-PAGE胶进行电泳过程中，一直以来都是按照说明书配制压缩胶和分离胶的，并且在说明书中，以配置2块胶为例，分离胶说明书中是让配置10ml，压缩胶是3ml。我一直以为是对应关系，在这次大悟之后我发现分离和压缩完全不是一对一对应关系，人家只是给了你配置这么多体积胶的配方而已，虽然在一个纵列上，但是绝不是对应关系（我确实才觉悟，高手轻鄙视哈）。5、接上一条经验，所以我在配胶过程中，下层分离胶配制了10ml，但是实际上每块玻板里面只加了大概3.5ml吧，也就是整个玻板高度的60-70%的样子。然后压缩

垂直电泳槽的使用

10孔梳子插入玻璃板之间。确保无气泡产生（图 7）。让浓缩胶聚合60分钟。 •在900 ml蒸馏水中稀释100 ml 10 X缓冲液，并添加SDS, 制成最后浓度为3.5mM的 SDS-PAGE电泳缓冲液。 •将两个翼型扳手均匀施力掰开，从灌胶模具中取出凝胶三明治夹。通过灌胶模具背后留的两个大孔，轻轻向上将三明治夹推出（图 8）。 •将电极放入垂直电泳槽内。贴着电极壁，将凝胶三明治夹垂直方向插入电极中（图 9）。 •把凝胶三明治夹置于合适的位置后，关闭电极门（图10）。