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- 2025年07月15日
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明迅生物
QuickMice™快速CKO纯合小鼠定制
条件性基因敲除（Conditional Knock-out，CKO）是指通过定位重组系统实现组织特异性的基因敲除。
利用传统Cre/LoxP系统构建CKO小鼠模型，需要构建Flox小鼠与特异性表达Cre的工具鼠交配，整个过程需耗时10-12个月以上，而且成功率不高。
明迅生物结合四倍体补偿技术，基因编辑技术及小鼠胚胎干细胞技术，开发的新一代模式小鼠技术（TurboMice™技术）可一次性编辑多个位点，由小鼠胚胎干细胞直接制备完整纯合基因编辑小鼠个体，绕开了常规技术耗时的繁育步骤，周期从1年以上缩短到2个月，达到理论上的极限速度，并使小鼠的生产效率由1-5%提高到了30-60%的水平，可一次性批量生产完全来自于基因编辑干细胞的小鼠。
明迅生物可以快速为客户提供CKO纯合小鼠模型，我们的科学家团队会为客户设计基因编辑方案，从源头帮助客户提高成功率。应用TurboMice™技术，我们可以直接通过编辑的胚胎干细胞3-5天内就可以完成筛选，然后构建四倍体胚胎，经母鼠代孕后，2-4个月就可以得到目标小鼠，可以为客户节省7-8月的时间。
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文献和实验价，3 到 4 个月快速定制基因敲除小鼠，只要 45000 元。别嫌贵，这都基本是半价。 图片来源：某公司官网 看着这些人畜无害的小家伙，再看看它动辄上万的身价，相信科研汪们买起来也会肉疼。不过，贵有贵的道理。 从技术上讲，敲除每一个基因，小鼠的品种都非常「难能可贵」。用不同的基因编辑方式对小鼠进行基因改造后，尚需几次传代才能筛选出纯合子小鼠。 图片来源：作者提供 从饲养来看，实验小鼠非常娇贵，与其说饲养，不如说供养——真是像在供着它。 小鼠生性敏感，噪音会导致它焦虑，异味会刺激
基因组 DNA 为模板进行 PCR 扩增，电泳确认 PCR 产物大小，对大小正确的产物进行测序，如测序结果与理论序列一致，则确认该基因编辑小鼠模型为正确重组模型。 TIPS 双臂 PCR 产物需测通：我们在实践中发现，即使 Donor 序列完全正确，部分鼠会存在突变或片段缺失的情况，我们推测是细胞在 Donor 重组前或过程中对 Donor 发生了编辑或重组后结构不稳定等原因所致，所以只对 Donor 各个部分接头测序是不严谨的，建议测通。 下面以 CKO 模型鉴定为例说明双臂 PCR 鉴定
。随后，才能进行杂合子小鼠的相互交配。注意点：-不同的 KO Founder 之间不能相互交配。-不同的 KO Founder 的子代之间也不建议相互交配。条件性基因敲除获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠（f/+；Cre-）×（f/+；Cre+）→ f/f；Cre+Flox 小鼠在去除 Neo 基因以后（CRISPR/Cas9 途径获得的 CKO 小鼠省略此步骤），获得仅含有两个 loxP 位点的 flox 杂合子小鼠（flox/+，可缩写成 f/+）。 flox 杂合子（f/+）小鼠与组织
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