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- 南模生物采用基因编辑技术根据客户需求量身定制出各种基因工程小鼠模型, 专业的团队给您专业的服务！
- 2025年09月15日
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上海南方模式生物科技股份有限公司
为了使我们的客户获得理想的动物模型，符合他们从基础科研到药物研发的研究需求，南模生物始终专注于模式生物的基因编辑与模型研发，拥有专业的项目设计团队与人工智能自动化分析系统SmartEddi，以及经验丰富、受过严格专业培训的实验技术队伍，自2000年以来建立了稳定而高效的基因工程小鼠研发服务平台，致力于提供最高标准的基因修饰动物模型解决方案。
我们使用以下三种基因修饰技术构建基因工程小鼠模型：
三种基因修饰技术的比较
| 核心技术类型 | 技术要点 | 周期 | 技术应用 | 优缺点 |
|---|---|---|---|---|
| CRISPR/Cas9技术 | Cas9 核酸酶剪切特定靶点 | 6–9 个月 | 基因敲除、条件性基因敲除、基因定点插入、点突变、基因人源化 | 技术周期短、效率高；有潜在脱靶风险，但风险可控（选择合适的sgRNA 可有效降低脱靶风险；通过测序可确定是否脱靶；传代可去除脱靶位点） |
| ESC 打靶 | 同源重组对靶基因进行修饰 | 9–12 个月 | 基因敲除、条件性基因敲除、基因定点插入、点突变、基因人源化 | 技术成熟、效果稳定、无脱靶，可实现大片段重组；实验周期较长 |
| Piggybac转基因技术 |
转座酶将片段整合到基因组 | 3–6 个月 | 基因过表达 | 单拷贝插入，表达阳性率高；多位点插入，后续实验需建系 |
ES细胞打靶
在小鼠ES细胞中，利用同源重组原理（也就是核苷酸序列在两个相似或相同的DNA分子之间交换的基因重组），获得带有研究者预先设计的遗传修饰的中靶ES细胞。经过遗传修饰的ES细胞仍然保持分化的全能性，可以发育为嵌合体动物的生殖细胞，使得经过修饰的遗传信息经生殖系遗传，最终获得基因修饰小鼠模型。发展至今，仍是最为经典、可靠的小鼠基因修饰或编辑技术。
目前南模生物可提供3种遗传背景的小鼠ES细胞：C57BL/6，129/S6，B6;129。
可用于获得以下类型小鼠模型：
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基因敲除
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条件性基因敲除
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KO first
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基因敲入
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点突变
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条件性点突变
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定点基因过表达
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人源化
南模生物会对每个项目进行分析与评估，综合时间与风险因素从而选用最合适的技术（ES细胞打靶或CRISPR基因编辑）。
联系我们，与南模生物的技术顾问讨论如何应用ES细胞打靶技术获得您的动物模型吧！
利用ES细胞打靶技术获得小鼠模型的一般流程
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设计并构建同源重组载体
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将同源重组载体转入小鼠ES细胞中
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筛选并验证中靶的阳性ES细胞克隆
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将阳性ES细胞注射到小鼠囊胚腔中
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将注射后的小鼠囊胚移植到假孕母鼠子宫内
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获得并筛选验证阳性嵌合体小鼠F0
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阳性F0通过与野生型小鼠或FLP小鼠交配获得F1代杂合子小鼠
CRISPR基因编辑
CRISPR / Cas9核酸酶系统需要两个组分：用于切割靶序列的Cas酶和与20个碱基对（bp）的靶序列结合指导RNA（sgRNA）。利用靶点特异性的sgRNA 指导 Cas9 核酸酶在基因组上的特定靶点进行DNA双链剪切。通过非同源末端连接（NHEJ）可导致移码突变，实现基因敲除（KO） ；通过同源重组修复（HR）可将外源片段整合到基因组指定位点（KI）。
CRISPR基因编辑技术的优势
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与传统的基因打靶方法相比，大大缩短了研发周期。
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打破对小鼠遗传品系的限制，实现不同遗传背景或在已有基因修饰小鼠模型基础上的基因编辑。
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降低基因敲除、敲入小鼠模型的定制成本。
南模生物使用最新的CRISPR / Cas9基因编辑技术为您定制属于您的基因工程小鼠模型。
我们会对每个项目进行分析与评估，综合时间与风险因素从而选用最合适的技术（CRISPR基因编辑或ES细胞打靶）。
联系我们，与南模生物的技术顾问讨论如何应用CRISPR技术获得您的动物模型吧！
利用CRISPR基因编辑技术获得小鼠模型的一般流程
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选择靶位点并设计sgRNA，设计同源重组载体（可选）
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制备sgRNA和Cas9 mRNA，构建同源重组载体（可选）
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将sgRNA和Cas9mRNA（以及同源重组载体（可选））注入小鼠受精卵中
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注射后的受精卵移植到假孕母鼠输卵管
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获得并筛选验证阳性F0代小鼠
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阳性F0通过与野生型小鼠交配获得F1代杂合子小鼠
转基因技术
通过原核显微注射，将设计好的基因（或多基因）注射并随机整合到小鼠基因组中，获得随机插入的转基因小鼠。也可以利用高效转座子piggyBac系统，更高效地获得转基因小鼠模型。
联系我们，与南模生物的技术顾问讨论如何获得您的转基因动物模型吧！
获得随机转基因小鼠模型的一般流程
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设计并构建转基因质粒
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将线性化的转基因质粒片段注射到小鼠受精卵中
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注射后的受精卵移植到假孕母鼠输卵管
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获得并筛选验证阳性F0代小鼠
利用高效转座子系统获得转基因小鼠模型的一般流程
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设计并构建piggyBac转座子质粒
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将转座子质粒与piggyBac转座酶共同注射到小鼠受精卵中
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注射后的受精卵移植到假孕母鼠输卵管
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获得并筛选验证阳性F0代小鼠
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文献和实验性。 2）如果这时随机插入没有同时伴随正确重组，还会产生重组假阳性的风险，用探针 Probe1/2 可以避免假阳性，但部分模型定制服务商只采用 Probe3，所以在接受模型服务商提供的鉴定报告时注意判断所用探针位置。 3、Southern blot 探针至少需 300-500bp，对于使用小于该长度的 Donor 的小鼠模型无法进行检测 4、F0 代检测结果不能代替 F1 代鉴定结果： 有的小鼠模型鉴定报告，用 F0 代小鼠的 Southern 鉴定结果代替 F1 代鉴定结果，这种直接代替是不严谨的。 1）受精
模型 集萃药康通过转基因技术构建了 MMTV-PyMT 小鼠模型，经验证，小鼠出现乳腺肿瘤的表型，并出现肺及唾液腺转移，可用于研究乳腺肿瘤的发生、发展及转移机制和乳腺肿瘤相关药物的筛选。 图 2. MMTV-PyMT 小鼠乳腺、肺及卵巢组织病理学检测 从病理检测结果可见：MMTV-PyMT 小鼠存在明显的炎性细胞浸润，并形成乳腺癌巢、乳腺癌转移灶、乳腺导管及曲精小管坏死等现象。 集萃药康除乳腺癌外还可提供肠癌、肝癌、肺癌、胰腺癌等多种癌种自发肿瘤模型，并可根据服务需求提供肿瘤模型定制服务
癌细胞变身「癌症杀手」！Science 子刊：哈佛开发新型癌症疫苗，既能抗肿瘤还能防复发
Medicine 杂志发表的一项研究中，来自哈佛医学院布莱根妇女医院的研究团队开发了一种新的细胞疗法来消除肿瘤，并诱导长期免疫力、训练免疫系统，使其能够预防癌症复发。该团队在致命的胶质母细胞瘤的小鼠模型中测试了他们的双效癌症杀伤疫苗，并取得了安全、有效的结果。 在这项研究中，科学家们正在利用一种新的方法将癌细胞转化为有效的抗癌剂。「我们的团队追求一个简单的想法：将癌细胞转化为癌症杀手和疫苗，」该研究的通讯作者 Khalid Shah 表示，「利用基因工程，我们正在重新利用癌细胞来开发一种杀死肿瘤细胞并刺激
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