KAPA HyperExplore 非人类序列捕获探针3Mb

手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因

重要，两个方向都可以选择。图 7 Guide RNA 设计流程选择一对 Guide RNA 来敲除基因敲除基因组一段序列，选择一对 Guide RNA 就显得非常重要。根据前人的实验，敲除基因 1Mb 并没什么问题。我们一般建议敲除 10Kb 以下。 选择一对 Guide RNA 的标准如下, ( 图 8 and 图 9 是两个实例)如果目的基因比较短，在 10kb 左右 ，建议敲除全基因，甚至包括启动子。如果目的基因比较长，建议敲除比较重要的外显子。目的基因比较长，也可以敲除全部的启动子和部分的基因

【求助】质粒构建不成功，课题无进展，请求帮助

还是老板亲自动手演示了一遍，学到正宗的克隆技术，才得以成功。关于你的这个克隆，我的意见如下： 1）选用好一点的聚合酶，保证序列的保真性。我们一直使用一种叫做KAPA HIFI READYMIX的酶，很方便，扩增能力和保真度都超级好。普通的taq酶扩增长片段容易出错，反而浪费时间和试剂。 2） 如果直接酶切PCR产物，请确保你的上下游引物5'端已经引入合适的酶切位点和保护碱基（非常重要），我当时选用的是XhoI和HindIII这两个位点。 3）凡是用来做克隆的DNA产物，跑胶一定

AluPCR:用重复序列引物扩增来源复杂的人DNA

19分之18的同源碱基，该序列 信息会使我们了解TC-65引物扩增的选择性质。更为重要的是鉴定这对可扩增Alu重复 子，可使我们在用其他引物扩增序列的反应中确定重要参数。　　已发现其他互补于相同区域Alu重复子的引物也能特异地扩增杂合细胞中的人DNA， TC-65引物中17个碱基的互补序列也有用，从杂合细胞人基因区扩增出一组独立片 段。没有尾部的引物有特别的用处，可从给定的DNA源扩增出更多的序列。例如，用 这些引物扩增X-30011.1细胞株，呈现出几百条带的一片，而含较少量人序列(1-2Mb