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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
92
- 英文名:
KAPA HyperExplore MAX 0.5Mb T4, 24 rxn
- 供应商:
上海博耀商贸有限公司
- 规格:
24
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文献和实验要用新鲜的TAE buffer,染EB也要用双蒸水EB溶液,避免污染。 4)最后做连接之前,把insert和vector各取2ul跑胶,看一下条带的亮度和size,如果都没有问题,可以进行连接反应。关于连接反应,我用的是NEB的T4 Ligase系统,我喜欢一个克隆设置3个反应,即insert分别为0ul,1ul和2ul。vector均为2ul,总体系10ul,室温下放置24小时候转化(老板说只要4个小时就可以转化,但是我没有试过),过夜孵育后观察克隆形成情况,快速胶检,一般都会得到阳性
含有这两种酶切位点序列。 已经开始进行ta克隆 如楼上战友所述,TA克隆的确是长片段亚克隆的好的手段。我最初开始学习构建质粒的时候也是先上TA,不过我们实验室一直使用一种KAPA HIFI readymix的酶,效果很好,保真性也非常非常高,就是做TA的时候比较麻烦,需要把PCR产物纯化回收后再加一次A tail,而就是这一步我感觉一直没有摸索到最优化稳定的条件,所以每次加A后连pCR2.1 转化的结果都不稳定,有时候长的多有时候长得少,之前曾经就这个问题发帖
上,而是从分子生物学水平上研究生物大分子,特别是核酸结构及其组成部分。在此基础上建立的众多检测技术中,核酸探针(Nuclear acid probe)和聚合酶链反应(Polymerase chain reaction)以其敏感、特异、简便、快速的特点成为世人瞩目的生物技术革命的新产物,业已逐步应用于食源性病原菌的检测。 1. 核酸探针 将已知核苷酸序列DNA片段用同位素或其他方法标记,加入已变性的被检DNA样品中,在一定条件下即可与该样品中有同源序列的DNA区段形成杂交双链,从而达到鉴定样品中DNA
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