- ￥3990
- 罗氏Roche（KAPA）
- 07959079001（KK2802）
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
62
- 英文名：
KAPA HiFi HotStart Uracil+ Kit (250rxn)
- 供应商：
上海博耀商贸有限公司
- 规格：
250
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文献和实验结果并非如此。如果大家需要使用热启动酶，建议向厂商索取的检测数据（如分子信标法检测，Ma et al., Anal Biochem, 2006），以证明其确实具有热启能力。2. 保真性保真性就是扩增过程中的错配率，对于 cDNA 克隆、文库构建的老师来说是尤为重要的参数。Taq 酶的保真性较低，而 Pfu、HiFi 等高保真酶具有 3’-5’ proofreading 功能，可以校正错配，保真度较高。保真性高于 Taq 酶 50 倍左右是比较常见的数值。我们也可以用 Lac I 分析的经典方法自己检测一下
含有这两种酶切位点序列。 已经开始进行ta克隆 如楼上战友所述，TA克隆的确是长片段亚克隆的好的手段。我最初开始学习构建质粒的时候也是先上TA，不过我们实验室一直使用一种KAPA HIFI readymix的酶，效果很好，保真性也非常非常高，就是做TA的时候比较麻烦，需要把PCR产物纯化回收后再加一次A tail，而就是这一步我感觉一直没有摸索到最优化稳定的条件，所以每次加A后连pCR2.1 转化的结果都不稳定，有时候长的多有时候长得少，之前曾经就这个问题发帖
还是老板亲自动手演示了一遍，学到正宗的克隆技术，才得以成功。关于你的这个克隆，我的意见如下： 1）选用好一点的聚合酶，保证序列的保真性。我们一直使用一种叫做KAPA HIFI READYMIX的酶，很方便，扩增能力和保真度都超级好。普通的taq酶扩增长片段容易出错，反而浪费时间和试剂。 2） 如果直接酶切PCR产物，请确保你的上下游引物5'端已经引入合适的酶切位点和保护碱基（非常重要），我当时选用的是XhoI和HindIII这两个位点。 3）凡是用来做克隆的DNA产物，跑胶一定
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