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℃下将收集的血浆分装保存,避免反复冻融。样本应避免溶血或高血脂。常见的抗凝剂包括EDTA钠盐,肝素钠,枸橼酸钠等。检测前请仔细阅读ELISA试剂盒说明书,查看该试剂盒针对抗凝剂是否有特殊要求。 细胞培养上清 将细胞培养上清液吸入离心管中,在2-8℃下以1000×g离心20分钟,除去细胞碎片和杂质,收集上清液备用,样本保存在-20℃或-80℃,避免反复冻融。 细胞提取液 反复冻融方法 1) 吸出培养板中的培养基,用胰蛋白酶消化细胞,然后加入适量的培养基将培养板上的细胞冲洗干净。悬浮
室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。生化实验一般建议用肝素抗凝。 ②样本保存:全血样本收集好后,若不能当天检测,4℃可保存1-2天。血清、血浆收集好后,若暂时不测定,可分装冻存备用,避免反复冻融,一般4℃可保存一周,-20℃可保存半个月,-80℃可保存一个月。特殊指标对样本有较高要求除外。 二、组织样本的收集和处理 1. 10%动物组织匀浆 取0.02-0.2 g新鲜动物组织块,用2-8°C的PBS(0.01 M,pH 7.4)漂洗,去除血液,滤纸拭干,称重,放入匀浆容器中,按照动物
由于DNA分型技术以PCR扩增为基础,对待测标本DNA的量要求不高,下面介绍的是采用微量全血法提取标本DNA,也可以采用其他类型的样本和其他方法提取DNA,但提取DNA的OD260/280比值范围应该为1.8~2.0。 (一)基因组DNA提取 [试剂配制和仪器要求](1)EDTA或枸橼酸钠抗凝全血约0.5ml(2)红细胞裂解液:(0.32mol/L 蔗糖,1%(v/v)TritonX-100,5mmol/L MgCl2,12mmol/L Tris-HClpH
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