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小鼠去卵巢心肌缺血再灌注模型

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  • 2026年01月06日
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    一、实验动物准备

    1. 动物选择:选择6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠,体重20-30g。
    2. 去卵巢手术
      • 小鼠腹腔注射麻醉剂(如戊ba比妥钠,50mg/kg)。
      • 在腹部中线切开皮肤,暴露卵巢并切除,随后缝合切口。
      • 术后恢复1周,待小鼠wan全康复后进行心肌缺血再灌注手术。

    二、心肌缺血再灌注模型构建

    1. 麻醉与固定
      • 小鼠腹腔注射麻醉剂(如戊ba比妥钠,50mg/kg),仰卧固定于手术台。
      • 剃除胸部毛发并消毒。
    2. 开胸与结扎
      • 在左侧胸部第4肋间切开皮肤和肌肉,暴露心脏。
      • 使用6-0尼龙线结扎冠状动脉左前降支(LAD),结扎位置距离左心耳下缘约2mm。
      • 结扎后观察心电图ST段抬高,确认心肌缺血成功。
    3. 缺血与再灌注
      • 结扎时间通常为30分钟。
      • 30分钟后松开结扎线,恢复血流,再灌注时间根据实验需求设定,一般为1-4小时。
    4. 术后处理
      • 缝合切口,胸腔内注入少量生理盐水以维持胸腔内负压。
      • 术后肌肉注射青霉素预防感染。

    三、模型评价

    1. 心电图监测
      • 记录手术前、手术中和再灌注后的心电图,观察ST段变化。
      • 缺血时ST段抬高,再灌注后ST段下降。
    2. 病理学分析
      • 使用TTC染色评估心肌梗死面积。
      • 通过HE染色观察心肌组织病理改变。
    3. 生化指标检测
      • 测定血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平,反映心肌损伤程度。
      • 检测氧化应激指标(如丙二醛MDA、超氧化物歧化酶SOD)。
    4. 炎症因子检测
      • 采用ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)等炎症因子水平。

    四、注意事项

    1. 手术操作:手术过程中需轻柔操作,避免损伤心肌。
    2. 麻醉管理:确保麻醉深度适中,避免因麻醉过深或过浅影响手术效果。
    3. 术后护理:术后密切观察小鼠的呼吸和活动情况,及时处理并发症。

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