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贫血小板血浆制备
制备步骤
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采血:
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从静脉抽取全血,通常使用含有抗凝剂(如枸橼酸钠)的采血管。抗凝剂可以防止血液凝固,确保血液在离心过程中保持液态。
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第一次离心:
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将采集的全血放入离心机中,进行第一次离心。离心条件通常为:
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离心力:200 - 300 × g
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时间:10 - 15 分钟
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温度:20 - 24°C
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离心后,血液会分为三层:上层为贫血小板血浆(PPP),中间层为白膜层(含有血小板和白细胞),下层为红细胞。
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分离上层血浆:
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用无菌吸管小心吸取上层的贫血小板血浆(PPP),避免触及中间的白膜层。将吸取的PPP转移到另一个无菌试管中。
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第二次离心(可选):
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如果需要进一步纯化PPP,可以进行第二次离心。离心条件通常为:
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离心力:1000 - 2000 × g
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时间:10 - 15 分钟
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温度:20 - 24°C
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离心后,上层即为更纯净的贫血小板血浆(PPP)。
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保存:
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制备好的贫血小板血浆可以分装到无菌试管中,置于-80°C冰箱中保存,避免反复冻融。
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注意事项
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无菌操作:整个采血、离心和分离过程应在无菌条件下进行,以防止污染。
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离心条件:离心力、离心时间和温度对血浆的质量有重要影响。离心力过大或时间过长可能会导致血小板活化,影响血浆的质量。
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抗凝剂选择:常用的抗凝剂包括枸橼酸钠、肝素等。枸橼酸钠是常用的抗凝剂,能够有效防止血液凝固。
应用
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文献和实验制备人干细胞无动物血清培养时的有效添加剂—混合人血小板裂解物
一个利用由40~50ml血液按常规方法制成的富血小板血浆制备混合人血小板裂解物,作为人干细胞无动物血清培养有效添加剂的可行程序。 0:00 制备人干细胞无动物血清培养时的有效添加剂—混合人血小板裂解物0 0:21 内容订阅21 0:55 内容简介55 1:32 制备人血小板裂解物92 6:36 人血小板裂解物的特性396 8:02 结论482 制备人干细胞无动物血清培养时的有效添加剂—混合人血小板裂解物本视频来源于网络,如有异议请联系
[原理] 在去钙离子的抗凝血浆中,重新加入适量的钙后,血浆就发生凝固,这一过程所经历的时间即为复钙时间(recalcification time,RT)。 [方法学评价]通常有两种方法:①表面玻璃皿法:本法比试管法敏感,但不如试管法简便。②试管法:仅用试管替代玻璃皿作试验。 RT测定方法也有改良,如以高速离心贫血小板血浆(platelet-poor plasma,PPp ,)因子血浆血小板减少测定结果时间较长;也有在血浆中加汲活剂的方法,称活化复钙时间。RT试管法虽较凝血
【原理】 在去钙离子的抗凝血浆中,重新加入适量的钙后,血浆就发生凝固,这一过程所经历的时间即为复钙时间(recalcification time,RT)。 【方法学评价】通常有两种方法: ①表面玻璃皿法:本法比试管法敏感,但不如试管法简便。 ②试管法:仅用试管替代玻璃皿作试验医`学教育网搜集整理。 RT测定方法也有改良,如以高速离心贫血小板血浆(platelet-poor plasma,PPp ,)因子血浆血小板减少测定结果时间较长;也有在血浆中加汲活剂
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