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质量指纹图谱(PMF)蛋白质组学

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  • 2025年07月15日
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      北京百泰派克生物科技有限公司

    • 服务名称

      质量指纹图谱(PMF)蛋白质组学

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    质量指纹图谱(PMF)蛋白质组学是一种基于质谱技术的蛋白质鉴定方法,通过对蛋白质进行酶切后分析肽段的分子量,生成独特的质量指纹图谱与数据库比对以鉴定蛋白质。质量指纹图谱(PMF)蛋白质组学在许多领域具有应用价值。在医学研究中,PMF技术广泛用于疾病相关蛋白质的鉴定,帮助揭示疾病的分子机制。例如,通过比较健康组织与病变组织的蛋白表达差异可以发现与肿瘤发生相关的蛋白标志物,为早期诊断和个性化治疗提供线索。在药物开发中,PMF能够用于鉴定潜在的药物靶点或评估候选药物对目标蛋白的作用效果。此外,PMF在农业领域的应用也非常广泛,例如筛选与作物抗逆性或高产性相关的关键蛋白质,为现代农业育种提供技术支持。质量指纹图谱(PMF)蛋白质组学的核心原理是利用每种蛋白质在特定酶(如胰蛋白酶)作用下产生的肽段具有特异性的分子量分布形成类似“指纹”的特征图谱。通过高分辨质谱对这些肽段的分子量进行精准测定可以得到一组肽段的质量数据,这些数据与已知蛋白质数据库(如UniProt或NCBI)进行比对快速锁定目标蛋白的身份。例如,在生物样品中,PMF方法可以鉴定复杂样品中的特定蛋白质从而解析细胞或组织在特定条件下的生物学状态。

     

    质量指纹图谱(PMF)蛋白质组学的实验流程相对清晰,包括样品制备、蛋白酶解、质谱分析和数据比对四个主要步骤。样品制备通常涉及蛋白质的提取和纯化以减少复杂背景的干扰并提高分析的灵敏度。蛋白酶解是PMF的关键步骤,胰蛋白酶是一种常用的酶切试剂,它可以在赖氨酸和精氨酸残基处切割蛋白质,产生具有特定分子量分布的肽段。随后通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)或电喷雾电离质谱(ESI-MS)对肽段质量进行检测,生成质量指纹图谱。

     

    质量指纹图谱(PMF)蛋白质组学的技术优势显著。首先,其实验流程相对简单高效,尤其适用于单一蛋白或简单蛋白混合物的快速鉴定。其次,MALDI-TOF MS等高分辨质谱技术能够提供高精度的质量数据,大大提高了鉴定的可靠性。此外,与其他蛋白质组学方法相比,PMF在分析速度和成本控制上具有明显优势,适合大规模筛查和分析。

     

    但是质量指纹图谱(PMF)蛋白质组学技术也存在一定的局限性,例如对于复杂蛋白混合物的分辨率较低,难以有效区分同源蛋白或含有大量翻译后修饰的蛋白质。此外,数据库的完整性和准确性对于PMF鉴定结果的可靠性至关重要,针对未知或缺乏数据库注释的蛋白质样品,PMF可能无法提供明确的鉴定结果。为了解决这些问题,近年来PMF技术与其他方法的结合逐渐成为研究热点。例如,将PMF与液相色谱(LC)结合可以实现复杂样品的分离和分级,提高肽段的检测覆盖率。与串联质谱(MS/MS)联用,则可以对肽段进行进一步碎片分析,从而提供更详细的结构信息。通过这些技术改进,PMF蛋白质组学在解析复杂样品中的应用潜力得到了极大提升。

     

    百泰派克生物科技在肽质量指纹图谱分析领域拥有深厚的技术积累,能够为客户提供从样品处理到质谱分析的全流程服务。我们以高精度的质谱检测平台和专业的数据分析团队,确保客户能够获得精准可靠的研究结果。

     

    百泰派克生物科技--生物制品表征,多组学生物质谱检测优质服务商

     

    相关服务:

    肽质量指纹图谱分析

     

    百泰派克生物科技特色项目

     

    一、蛋白测序

    百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析,提供基于质谱的蛋白测序分析服务,包括对蛋白质的氨基酸组成分析,N端测序,C端测序和全序列分析,以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质,提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务,对蛋白序列进行分析。

     

    ※服务优势:

    1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

    2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

    3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

    4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

    5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug,即可完成检测;

    6.测序不受N端封闭,PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

     

     

    二、蛋白质组学

    百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC,提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务,助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

     

    ※服务优势:

    1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析,发现新的生物标记物;

    2.体内体外多种蛋白质标记方法,适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

    3.质谱分析灵敏度高,实验结果重复度高;

    4.可检测较低丰度蛋白,线性范围广;

    5.专业生物信息学分析,分析更系统准确。

     

     

    三、单细胞质谱流式技术分析

    百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析,采用金属元素标记物(通常是金属元素标记的特异抗体)标记细胞表面和内部的分子,然后用流式细胞原理分离单个细胞,再用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析单个细胞的原子质量谱,最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

     

    ※服务优势:

    1.技术先进,填补技术空白

    采用金属标记抗体技术,避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征,百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

    2.分析数量大,成本较低

    单细胞RNAseq受成本等因素限制,所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右,而流式质谱技术一次(单样本)就可分析至少10^5的细胞,实现了数量级的提高,且成本不高于单细胞RNAseq。

    3.应用前景大

    ①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化,在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景;

    ②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外,质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰;

    ③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

     

     

    四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

    百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析,可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究,旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案,深入挖掘未知的靶标。

     

     

    五、生物药物表征

    百泰派克基于高分辨率质谱技术,MALDI TOF,高效色谱分离技术,提供一系列完善的生物药物分析方案,从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析,到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务,帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

     

    六、基因敲除

    百泰派克生物科技(BTP)采用优化的CRISPR/Cas9系统为您提供高通量基因敲除服务,包括病毒包装、质粒制备、Cas9浓度测试等,为您解决选择哪个细胞进行敲除、可不可以敲除、如何敲除以及敲除效率如何等关键问题。可进行单/多基因敲除、移码突变和大序列敲除。我们的人全基因组基因敲除阵列Array文库覆盖了完整的人类全基因组,全基因组阵列敲除库已在人原代细胞全部完成高内涵筛选的验证,超过80%以上的靶点达到70%以上的敲除效率。

     

    ※服务优势:

    1.样本适用性强

    适用于人、小鼠的细胞系,原代细胞,免疫细胞及iPS细胞等。

    2.基因必要性及表达量分析

    在进行基因敲除实验前,我们会基于生物信息学和蛋白质组学数据对不同细胞中基因必要性及表达量进行分析,确保实验的可行性,降低实验风险。

    3.gRNA无需从头设计和验证

    我们完成了人类全基因组gRNA的全部验证,与药物相关的靶点也完成了PCR测序验证,无需针对客户的靶点设计预实验进行gRNA验证,大大缩短了项目周期。

    4.高通量高效率

    我们采用优化的CRISPR/Cas9系统进行高通量基因敲除,多个sgRNA/靶基因设计保证高敲除效率,超过80%靶点敲除效率在70%以上,短期内(10天内)即可提供高敲除效率的KO pool,满足绝大多数的应用场景。

    5.敲除效率双验证

    基因敲除后,我们采用WB实验中抗体KO验证的shǒuxuǎn方法——Sanger测序和深度蛋白质组学技术对敲除效率进行双验证,数据真实性的双重保障。

     

     

    百泰派克生物科技七大检测平台

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    百泰派克生物科技-生物制品表征,生物质谱多组学优质服务商

    北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则,通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证,建立了完备的质量体系,数据冷热/异地备份,设备定期计量/期间核查,软件审计追踪,为客户提供一体化解决方案和技术服务,支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

    1.公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;

    2.获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;

    3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;

    4.七大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;

    5.服务3000+企业,10000+客户的选择;

    6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

     

    风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。

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      蛋白质组学经典的基子凝胶的方法       从历史观点上来说,蛋白质组学与利用二维凝胶电泳技术的大规模蛋白质鉴定和质谱紧密相关,其中电泳作为分离方法,质谱作为后续的分析工具。尽管这种方法已经不能涵盖在复杂的生物样品中发现的所有蛋白质,但是它依然在相当多的实验室中使用。在这种处理方法中,蛋白质样品应遵从于二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D―PAGE)的高分辨率和分离能力。二维凝胶电泳是由O’Farrel(1975)、Anderson和nderson(1982)、Scheele

    • Zerg入门级文献推荐

      ,现在一般都采用多酶切进行。 • 蛋白质肽段的检出受蛋白含量、抽提溶解效率、其它杂质、离子化模式以及质谱检测性能等诸多因素的影响。外来蛋白的污染会带来结果的假阳性、抽提中残留的盐和变性剂的会影响离子化效率。 • 基于肽段分析的蛋白质组鉴定方法分为三类:⑴基于理论酶解蛋白肽库的肽质量指纹图谱法,此法随着搜索数据库容量的急剧增加要求质谱提供更为精确的肽段质量数值,以及检出更多的肽段以提高匹配覆盖率;⑵来自于串联质谱具有合适匹配质量数的单肽段的碰撞诱导解离(CID)谱;⑶de novo策略

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