禽传染性法氏囊炎病毒（IBDV）核酸检测试剂盒

产品名称：禽传染性法氏囊炎病毒（IBDV）核酸检测试剂盒
Name   ： Diagnostic Kit for Infectious Bursal Disease Virus RNA
精准检测 | 快速诊断 | 助力科研
本试剂盒用一对禽传染性法氏囊炎病毒特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用一步法荧光 RT-PCR 技术对禽传染性法氏囊炎病毒 RNA 进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染病料的病原学检测。
试剂组成包含：IBDV 反应液、酶液、IBDV 阳性质控品、阴性质控品
技术参数
项目              参数详情
检测方法        荧光定量PCR/LAMP/RPA-LFD（可选）
保存条件       -20℃避光保存，有效期12个月，避免反复冻融（≤5次）
适用仪器        ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
样本类型        病死或扑杀禽，取消化道组织；待检活禽，取排泄物，放于 1mL50%甘油生理盐水中，用注射器取血 5mL。
保存和运输     采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。
操作流程（以荧光PCR为例）
1.    样本处理：组织：分别从 3 个不同位置取样，称取样品约 1g，用手术剪剪碎混匀，再称取 0.5g 于研磨器中研磨，加入1.5mL 生理盐水继续研磨，待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中，8000rpm 离心 2min，取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中；排泄物：取 0.5g 于 1.5mL 灭菌离心管中，加入 1mL 生理盐水涡旋振荡，8000rpm 离心 2min， 取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。
2.    试剂配制：加入预混反应液、酶及模板，离心混匀。
3.    扩增检测：运行预设程序（如：95℃预变性2min，95℃ 15s→60℃ 30s，45循环），分析Ct值。
结果判读
    阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；
    阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。
-    严格质控标准：每批次试剂通过灵敏度、重复性、特异性验证，符合ISO 13485体系。
-    配套服务：提供技术培训、实验方案优化及数据分析支持。
质控标准
阴性质控品：无特异性扩增曲线或无 Ct 值显示；
阳性质控品：扩增曲线有明显指数增长期，且 Ct 值≤32；
以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
应用案例
-    科研机构研究
检测方法的局限性
1.    样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关；
2.    样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果；
3.    阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果；
4.    病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果；
5.    不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果；
6.    试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果；
7.    本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3.反应液应避光保存；
4.反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5.使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7.实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8.试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
9.本产品仅供科研。
参考文献
[1] 国家质量监督检验检疫总局. GB/T 19167-2020 传染性法氏囊病诊断技术[S].
本试剂盒适用于检测的消化道组织、取排泄物、全血等标本中禽传染性法氏囊炎病毒 RNA，适用于禽传染性法氏囊炎病毒感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。