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Tris-HCl缓冲液(0.05mol/L,pH7.0-9.0,RNase free)优惠价格
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999
- 供应商:
上海圻明
- 规格:
500ml
Tris-HCl缓冲液(0.05mol/L,pH7.0-9.0,RNase free)优惠价格购买欢迎来电垂询,上海圻明生物优势现货供应。
产品应用PCR、定量PCR、蛋白电泳纯化、克隆工具酶系列等。更多产品资料欢迎免费索取。
1. 使用前将 Calcein AM 和 EthD-1 溶液瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. Calcein AM 和 EthD-1 为荧光染料,均存在荧光淬灭的可能性,实验操作时注意尽量避光,以减缓荧光淬灭。
3. Calcein AM 需要保存在封闭、干燥的环境中,在潮湿环境容易水解,因此建议首次使用按照实验需求进行分装(本产品的包装袋中放置了干燥剂,分装后建议放回原包装袋,
密封保存)。
4. Calcein AM 在水溶液中容易水解,因此 Calcein AM 工作液必须现配现用。
5. 血清对细胞染色有一定的干扰,建议实验时尽量用不含血清的缓冲液。
1) 准备染色工作液及按上述步骤染色细胞。另外,分别准备 1 ml 2μM Calcein AM
和 4μM EthD-I 溶液,按照下列组别进行染色。对于下面组别的细胞或无细胞
组,需要保持检测工作液浓度、孵育时间和孵育温度的完全一致。
2) 样品组及对照组测量:
A. 样品组在 645 nm 处的测量值,记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(645)sam。
B. 样品组在 530 nm 处的测量值,记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(530)sam。
C. 死细胞 EthD-1 单染对照组在 645 nm 的测量值,记为 Calcein AM =F(645)max。
D. 死细胞 Calcein AM 单染对照组在 645 nm 的测量值,记为 Calcein AM =F(645)min。
E. 活细胞 EthD-I 单染对照组在 530 nm 的测量值,记为 EthD-I=F(530)min。
F. 活细胞 Calcein AM 单染对照组在 530 nm 的测量值,记为 Calcein
AM=F( 530 ) max。
G. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可),530 nm 处的检测值记为
F(530)0。
H. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可),645 nm 处的检测值记为
F(645)0。
3) 根据测量数据计算死细胞与活细胞的比例:
% Live Cells=
F(530)sam−F(530)min
F(530)max−F(530)min
×100%
% Dead Cells=
F(645)sam−F(645)min
F(645)max−F(645)min
×100%
使用 70%甲醇致死处理 293T 细胞,用 2μM Calcein AM 和 4μM EthD-1 的染色工作液对细胞染色 20 min 后进行荧光显微镜观察,结果如图 2 所示。

pcDNA3.1/pre-miR-204 pre-miR-204 Amp
pcDNA3.1/pre-miR-143 pre-miR-143 Amp
pcDNA3.1-LNC-REG3G-3 LNC-REG3G Amp
pcDNA3.1-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 Amp
pcDNA3.1-FGD5-AS1 FGD5-AS1 Amp
pcDNA3.1-KCNQ101T1 KCNQ101T1 Amp
pcDNA3.1-h-RSF1 h-RSF1 Amp
pcDNA3.1-h-LOXL2 h-LOXL2 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21-AS1 h-SOX21-AS1 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21 h-SOX21 Amp
pcDNA3.1-h-LINC00958 h-LINC00958 Amp
pcDNA3.1-LINC01811 LINC01811 Amp
pcDNA3.1-LOC101928219 LOC10928219 Amp
pcDNA3.1-Lnc-BCYRN1 Inc-BCYRN1 Amp
pcDNA3.1-lncRNA-ISR22 lncRNA-ISR22 Amp
pcDNA3.1-circ-001862 circ-001862 Amp
pcDNA3.1-circ0058514 circ0058514 Amp
pcDNA3.1-circ-sirt1 circ-sirt1 Amp
pSilencer-siSTX18-AS1 STX18-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-AFAP1-AS1 AFAP1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC-REG3G LNC-REG3G shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC00507 LNC00507 shRNA Amp
pSilencer-shR-RNASEH1-AS1 RNASEH1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-SPACA6P-AS SPACA6P-AS shRNA Amp
pSilencer-shR-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC00115 LINC00115 shRNA Amp
pSilencer-shR-INCRNAISR22 INCRNAISR22 shRNA Amp
pSilencer-shR-Lnc-DLK1 Lnc-DLK1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC01811 LINC01811 shRNA Amp
pSilencer-shR-LOC10928219 LOC10928219 shRNA Amp
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pSilencer-shR-circ0001862 circ0001862 shRNA Amp
pSilencer-shR-circ0058514 circ0058514 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-5193 miR-5193 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-4635 miR-4635 shRNA Amp
pcDNA3.1-ADAMDEC1 ADAMDEC1 Amp
pcDNA3.1-ASIC2 ASIC2 Amp
pcDNA3.1-Myc-B27(C-tag) B27 Amp
pcDNA3.1-BLK BLK Amp
pcDNA3.1-Braf Braf Amp
pcDNA3.1-HA-CD58 CD58 Amp
pcDNA3.1-CLIC4 CLIC4 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD134 CD134 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD274 CD274 Amp
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文献和实验0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10)
pH 0.2mol/L Tris(ml) 0.2mol/L HCl(ml) H2 O
柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。 磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。 三羟甲基氨基甲烷:它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视,在室温pH是7.8的Tris一缓冲液,在4℃时是8.4,在37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下
至400 ml,用200mol/L盐酸溶液调节PH值至 7.4滤过,即得。 巴比妥缓冲液(PH8.6) 取巴比妥5.52 g与巴比妥钠30.9 g,加水使溶解成2000 ml,即得。 巴比妥―氯化钠缓冲液(PH7.8) 取巴比妥钠5.05 g,加氯化钠3.7 g及水适量溶解,另取明胶0.5 g加水适量,加热溶解 后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节PH值至7.8,再加水稀释至500 ml即得。 甲酸钠缓冲液(PH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25 ml,加酚酞指示
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