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- 文献和实验
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4℃,避光,6个月
- 保质期:
见标签
- 英文名:
MOPS缓冲盐水(5×,pH7.0)优惠价格
- 库存:
999
- 供应商:
上海圻明
- 规格:
100ml,250ml
MOPS缓冲盐水(5×,pH7.0)优惠价格购买欢迎来电垂询,上海圻明生物优势现货供应。
产品应用PCR、定量PCR、蛋白电泳纯化、克隆工具酶系列等。更多产品资料欢迎免费索取。
1. 使用前将 Calcein AM 和 EthD-1 溶液瞬时离心至管底,再进行后续实验。
2. Calcein AM 和 EthD-1 为荧光染料,均存在荧光淬灭的可能性,实验操作时注意尽量避光,以减缓荧光淬灭。
3. Calcein AM 需要保存在封闭、干燥的环境中,在潮湿环境容易水解,因此建议首次使用按照实验需求进行分装(本产品的包装袋中放置了干燥剂,分装后建议放回原包装袋,
密封保存)。
4. Calcein AM 在水溶液中容易水解,因此 Calcein AM 工作液必须现配现用。
5. 血清对细胞染色有一定的干扰,建议实验时尽量用不含血清的缓冲液。
1) 准备染色工作液及按上述步骤染色细胞。另外,分别准备 1 ml 2μM Calcein AM
和 4μM EthD-I 溶液,按照下列组别进行染色。对于下面组别的细胞或无细胞
组,需要保持检测工作液浓度、孵育时间和孵育温度的完全一致。
2) 样品组及对照组测量:
A. 样品组在 645 nm 处的测量值,记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(645)sam。
B. 样品组在 530 nm 处的测量值,记为 Calcein AM 和 EthD-1=F(530)sam。
C. 死细胞 EthD-1 单染对照组在 645 nm 的测量值,记为 Calcein AM =F(645)max。
D. 死细胞 Calcein AM 单染对照组在 645 nm 的测量值,记为 Calcein AM =F(645)min。
E. 活细胞 EthD-I 单染对照组在 530 nm 的测量值,记为 EthD-I=F(530)min。
F. 活细胞 Calcein AM 单染对照组在 530 nm 的测量值,记为 Calcein
AM=F( 530 ) max。
G. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可),530 nm 处的检测值记为
F(530)0。
H. 没有细胞的空白对照孔(加染料或不加染料均可),645 nm 处的检测值记为
F(645)0。
3) 根据测量数据计算死细胞与活细胞的比例:
% Live Cells=
F(530)sam−F(530)min
F(530)max−F(530)min
×100%
% Dead Cells=
F(645)sam−F(645)min
F(645)max−F(645)min
×100%
使用 70%甲醇致死处理 293T 细胞,用 2μM Calcein AM 和 4μM EthD-1 的染色工作液对细胞染色 20 min 后进行荧光显微镜观察,结果如图 2 所示。

pcDNA3.1/pre-miR-204 pre-miR-204 Amp
pcDNA3.1/pre-miR-143 pre-miR-143 Amp
pcDNA3.1-LNC-REG3G-3 LNC-REG3G Amp
pcDNA3.1-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 Amp
pcDNA3.1-FGD5-AS1 FGD5-AS1 Amp
pcDNA3.1-KCNQ101T1 KCNQ101T1 Amp
pcDNA3.1-h-RSF1 h-RSF1 Amp
pcDNA3.1-h-LOXL2 h-LOXL2 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21-AS1 h-SOX21-AS1 Amp
pcDNA3.1-h-SOX21 h-SOX21 Amp
pcDNA3.1-h-LINC00958 h-LINC00958 Amp
pcDNA3.1-LINC01811 LINC01811 Amp
pcDNA3.1-LOC101928219 LOC10928219 Amp
pcDNA3.1-Lnc-BCYRN1 Inc-BCYRN1 Amp
pcDNA3.1-lncRNA-ISR22 lncRNA-ISR22 Amp
pcDNA3.1-circ-001862 circ-001862 Amp
pcDNA3.1-circ0058514 circ0058514 Amp
pcDNA3.1-circ-sirt1 circ-sirt1 Amp
pSilencer-siSTX18-AS1 STX18-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-AFAP1-AS1 AFAP1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC-REG3G LNC-REG3G shRNA Amp
pSilencer-shR-LNC00507 LNC00507 shRNA Amp
pSilencer-shR-RNASEH1-AS1 RNASEH1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-SPACA6P-AS SPACA6P-AS shRNA Amp
pSilencer-shR-FLVCR1-AS1 FLVCR1-AS1 shRNA Amp
pSilencer-shR-LINC00115 LINC00115 shRNA Amp
pSilencer-shR-INCRNAISR22 INCRNAISR22 shRNA Amp
pSilencer-shR-Lnc-DLK1 Lnc-DLK1 shRNA Amp
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pSilencer-shR-circ0001862 circ0001862 shRNA Amp
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pSilencer-shR-miR-5193 miR-5193 shRNA Amp
pSilencer-shR-miR-4635 miR-4635 shRNA Amp
pcDNA3.1-ADAMDEC1 ADAMDEC1 Amp
pcDNA3.1-ASIC2 ASIC2 Amp
pcDNA3.1-Myc-B27(C-tag) B27 Amp
pcDNA3.1-BLK BLK Amp
pcDNA3.1-Braf Braf Amp
pcDNA3.1-HA-CD58 CD58 Amp
pcDNA3.1-CLIC4 CLIC4 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD134 CD134 Amp
pcDNA3.1-3×Flag-CD274 CD274 Amp
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文献和实验试剂: (1)MOPS缓冲液(10*):0.4mol/L 吗啉代丙烷磺酸(MOPS) (Ph7.0),0.1mol/L NaAc, 10mol/L EDTA。 (2)上样染料:50%甘油,1mmol/L EDTA ,0.4%溴酚蓝,0.4%二甲苯蓝。 (3)甲醛。 (4)去离子甲酰胺。v电泳槽清洗:去污剂洗干净(一般浸泡过夜)——水冲洗——乙醇干燥——3%H2O2灌满——室温放置10分钟——0.1%DEPC水冲洗。 操作:
,在通风橱中,加入2ml DEPC到2升去离子水中,终浓度为0.1%的DEPC。迅速盖上盖子,混匀,然后放在摇床中中速摇荡至少4hr,再高压灭菌。灭菌时将瓶盖松开,15磅灭菌20min。2、10 × FA Buffer(formaldehyde agarose buffer:200 mM的MOPs,50 mM的NaAc,10 mM的EDTA):配制500ml,称取3.4g NaAC•3H2O放入1000ml烧杯中,加入400ml DEPC 处理过的去离子水,加入搅拌子,放在磁力搅拌器上溶解。然后加
一、直接免疫荧光法(一)基本原理将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查。(二)试剂与仪器 磷酸盐缓冲盐水(PBS):0.01mol/L,pH7.4 荧光标记的抗体溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS进行稀释 缓冲甘油:分析纯无荧光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份
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