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100ul;500ul
浓度: ≥1 *10^8 TU/mL
该慢病毒载体包含EF1α启动子驱动的荧光素酶 基因,CMV启动子驱动 的copGFP(一种绿色荧光蛋白)基因,以及嘌 呤霉素抗性基因。P2A 肽用于实现荧光素酶和cop GFP的共表达。cop GFP可用于可视化细胞 转导效率,而荧光素酶用于报告基因实验。
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文献和实验1.常用载体分类:2,常用载体元件介绍:(1) 启动子:启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。启动子主要分为广谱启动子和特异性启动子。广谱启动子为在各种组织、细胞上广泛表达的启动子;特异性启动子为在特异性组织或者细胞类型上表达的启动子。常用广谱启动子有CAG,CMV,EF1a,PGK等,还包含启动RNA的III型启动子U6和H1启动子;常用特异性启动子如成熟神经元特异性启动子hSyn,投射神经元特异性启动
EGFP 荧光表达。 检测结果显示靶点一和靶点二均有效果,靶点一的效果优于靶点二。 TP53 基因敲除 293T 细胞筛选 实验步骤 1) 转染前 24 小时将 293T 铺到 6 孔板中。 2) 按照下列体系制备质粒稀释液 pCas9/gRNA1-P531 0.7ug pLV-EGFP(2A)puro 0.1ug DMEM 培养基 X ul 总体积 50ul 3) 准备转染
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