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- 山东济南
- 2025年12月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
丽山生物
- 服务名称：
质粒载体构建
- 规格：
2μg
简介：
丽山生物质粒平台研发团队在定制化质粒载体构建领域深耕数年，可根据客户的需求提供全方位、定制化质粒构建及生产服务，包括过表达、基因敲除、定点突变等载体构建业务，拥有从基因合成、载体构建到大肠杆菌发酵、质粒纯化、质量检测的一站式服务，丰富的质粒构建和工艺开发经验，奠定了坚实的技术基础，为您提供多种定制化服务。
服务流程：
服务优势：
- 专注载体构建服务多年
- 已服务多家高校科研院所和企业用户
- 产品准时交付率超98%，客户反响好
- 完善的客户服务体系（技术支持、项目跟进、售后服务）确保您订购无忧
服务内容：
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文献和实验wj1989113 最近一直在做慢病毒载体，用的是第二代的三质粒系统，目的片段是一个肝细胞的转录因子。载体构建好之后，包装了一批病毒。然后拿慢病毒感染肝癌细胞株3B和Huh7细胞，想通过PCR和Western验证病毒的表达情况。出现了一些问题： 1、每次拿慢病毒感染肝癌细胞株，荧光都很亮，但是做PCR或者Western之后，加对照病毒GFP组的细胞和目的病毒无差异。（条带都较亮）尤其是Western，几乎没有差异。 2、感染
携带cas9的载体提供。这两种模式载体均携带有额外的抗性筛选标记。 2、gRNA文库扩增 上述构建的载体数量较少，不足以进行文库的慢病毒包装和使用。因此，需要对上述载体进行扩增，增加总量。上述gRNA载体构建完成后，我们将这些载体按相同的比例混合成一个pool（即载体混合库），随后将载体混合库使用专用电转感受态，电转扩增培养并收集菌落，并进行扩大培养，最后抽提质粒，即得到了扩增后的载体混合库，也就是文库。 3、gRNA文库慢病毒包装 扩增后的gRNA文库在慢病毒包装载体的辅助下转染293
设计：客户提供靶基因名称、序列或GeneBank ID号 2) shRNA载体构建(靶基因4个，阴性对照1个，阳性对照1个) 3) 质粒扩增、纯化 4) 转染靶细胞(客户提供靶细胞及其培养方法等相关资料) 5) 抑制效果检测：实时荧光定量PCR检测mRNA表达，Western Blot检测蛋白表达 6) 提供实验报告：shRNA序列、测序报告、荧光定量PCR报告、WB报告等。 ■ 慢病毒介导的RNA干扰
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