Tris-Acetate-PAGE凝胶配制试剂盒(大分子量蛋

碧云天生产的Tris-Acetate-PAGE凝胶配制试剂盒(大分子量蛋白用) (Tris-Acetate-PAGE Gel Preparation Kit for High Molecular Weight Protein)，提供了配制Tris-Acetate-PAGE凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制不同浓度的Tris-Acetate-PAGE凝胶(即聚丙烯 酰胺凝胶)。Tris-Acetate-PAGE凝胶主要用于大分子量蛋白(40-500kDa)的检测。

聚丙烯 酰胺凝胶电泳(Polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)技术广泛用于蛋白质、核酸及蛋白质-核酸复合物的分离纯化、检测、鉴定、分子量分析等实验，是生命科学研究中最基本的实验技术之一。常见的Western印迹(Western blot)检测就是基于PAGE的。Glycine-SDS-PAGE (也被称为Laemmli-SDS-PAGE，基于Tris-Glycine缓冲系统)和Tricine-SDS-PAGE (基于Tris-Tricine缓冲系统)是广泛应用的将蛋白质按照分子量大小分离的方法[1]。Tricine-SDS-PAGE可以很好地分离小于30kDa的蛋白质，而Glycine-SDS-PAGE被建议用于大于30kDa的蛋白。不同体系分离蛋白质的特性与Glycine和Tricine的pKa值有关，不同大小的蛋白质在不同的缓冲体系中拥有不同的电泳迁移率，且特定范围内的蛋白质分辨率较高。因此，如果需要分离大分子量蛋白，就需要选择合适的电泳系统[2]。同时，也建议使用从上至下丙烯 酰胺浓度升高的梯度胶[3]。目前研究中常用Tris-Acetate凝胶系统分离大分子量蛋白。在Tris-Acetate凝胶系统中，Acetate(-)来自凝胶缓冲液，相较于系统中其它的阴离子，Acetate(-)对阳极具有极高的亲和力，因此可作为前导离子(Leading ion)。凝胶缓冲液中含有Tris(+)和Acetate(-)，pH为7.0，使凝胶具有很高的分辨率。电泳缓冲液中含Tris(+)、Tricine(-)和十二烷基硫酸盐(Dodecylsulfate, DS)，其中Tricine(-)作为尾随离子(Tailing ion)。电泳缓冲液pH约为8.24，减少了蛋白修饰干扰，使条带更锐利。对高分子量蛋白进行电泳分离的实际检测结果也表明，Tris-Acetate凝胶分离效果好、灵敏度高、分辨率佳。此外，Tris-Acetate凝胶也被报道可以作为一种稳定的、经济高效的研究蛋白质寡聚化的工具，仅使用单一凝胶即可提供出色的蛋白质寡聚化研究结果[4]。

本试剂盒提供的Gel Buffer使用中性pH的Tris-Acetate缓冲液制备，不含SDS，既可用于变性蛋白电泳，也可用于非变性蛋白电泳[5]。推荐使用碧云天专门为Tris-Acetate凝胶系统研制的配套电泳液：对于变性蛋白电泳，推荐使用BeyoGel™ Tris-Acetate SDS Running Buffer (20X) (P0749)；对于非变性蛋白电泳，推荐使用非变性PAGE电泳液(Tris-Gly, Powder) (P0014F/P0014G)。电泳后可以使用Tris-Glycine缓冲系统的转膜液进行转膜，但需降低转膜液中乙醇或甲醇浓度(至5%)，推荐使用Western转膜液(P0021A或P0021B)。

本试剂盒约可配制30-50块常规大小的Tris-Acetate-PAGE凝胶。具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。如果配备梯度胶制备器，也可用于梯度胶的配制。

包装清单：

保存条件：

4ºC保存，一年有效。40% Acr-Bis (37.5:1)、Gel Buffer (15X)和TEMED Substitute须避光保存。凝胶聚合催化剂也可以室温保存。凝胶聚合催化剂用蒸馏水配制成10%溶液后，分装成小管-20ºC保存，通常半年内有效。

注意事项：

凝胶聚合催化剂用水配制成10%溶液后，应当分装成小管-20ºC保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。

TEMED Substitute易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节凝胶聚合催化剂和TEMED Substitute的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。

TEMED Substitute易燃，有腐蚀性，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其他物品。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。