- ￥528 - 1698
- 碧云天（beyotime）
- D0051
- 2025年11月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
50次/200次
| 规格： | 50次 | 产品价格： | ￥528.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 200次 | 产品价格： | ￥1698.0 |
碧云天研发生产的BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒，即BeyoMag™ Residual DNA Sample Preparation Kit with Magnetic Beads，也称宿主细胞残留DNA提取试剂盒(Residual Host Cell DNA Preparation Kit)或残留DNA样品前处理试剂盒，是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，用于稳定、高效、便捷地从各种生物制品的中间品、半成品和成品中提取并纯化残留的大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物等宿主细胞微量DNA的试剂盒。本试剂盒制备的DNA样品可以用于相关DNA残留qPCR检测试剂盒。
本试剂盒的原理和操作流程如图1所示。样品中蛋白首先被蛋白酶K消化，释放出来的基因组DNA在特定条件下与磁珠特异性结合。在外界磁场(如磁分离架)的作用下，磁珠与相应溶液可以快速高效地分离。随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来[1-3]。整个过程无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，全程仅需约20分钟即可完成。
图1. BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒(D0051)抽提DNA原理示意图。
本试剂盒可搭配碧云天大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7701)等残留DNA检测试剂盒用于残留检测，使用E.coli DNA Control模拟样品的回收率测试结果见下表。
| 回收前残留DNA浓度 | 回收前体积 | 回收后残留DNA浓度 | 回收后体积 | 回收率 |
| 30fg/μl | 100μl | 32.6fg/μl | 100μl | 109% |
| 3fg/μl | 100μl | 3.08fg/μl | 100μl | 103% |
注1：回收率和样品浓度、体积、样品种类及实验操作等的不同而存在差异，表中数据仅供参考。
注2：根据中华人民共和国药典(2020年版‧三部)“外源性DNA残留测定法”中“第三法 定量PCR”对于结果计算的要求，加标样品的回收率应在50%~150%之间。
本试剂盒在提取低至飞克(Femtogram, fg)水平的残留DNA时仍具有较高的回收率，通常无需添加糖原、酵母RNA或Poly A等Carrier RNA或Oligo dT等Carrier DNA。使用本试剂盒对100μl模拟待测样品(含BSA)以及对应的加标样品(即在待测样品基础上再添加一定量的标准品)进行样品制备操作，并使用碧云天大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7701)检测样品浓度。回收率计算结果见下表。
| 重复 | 待测样品CT值 | 待测样品lgCT | 待测样品浓度 | 加标样品CT值 | 加标样品lgCT | 加标样品浓度 | 回收率 |
| 1 | 33.53 | 0.97 | 9.36fg/μl | 31.6 | 1.54 | 35.0fg/μl | 85.4% |
| 2 | 34.30 | 0.74 | 5.53fg/μl | 31.84 | 1.47 | 29.7fg/μl | 80.5% |
| 3 | 33.82 | 0.89 | 7.68fg/μl | 31.73 | 1.51 | 32.0fg/μl | 81.1% |
注：上表中用于计算样品浓度的E.coli DNA标准曲线公式为：Y = -3.371X + 36.80，其中Y为CT值，X为该待测样品浓度的对数，斜率和Y轴截距是由荧光定量PCR仪自动生成。上表中用于计算加样回收率的公式为：(加标样品的浓度 - 待测样品的浓度) × 洗脱体积 / 加标量。洗脱体积为100μl，加标量为3000fg E.coli DNA。
本试剂盒小包装可以抽提50个样品的总DNA，中包装可以抽提200个样品的总DNA。
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D0051S-1 | BeyoMag™磁珠 | 1ml |
| D0051S-2 | 蛋白酶K | 1ml |
| D0051S-3 | 洗涤液Ⅰ (首次使用前加入7ml无水乙醇) | 21ml (+7ml) |
| D0051S-4 | 洗涤液Ⅱ (首次使用前加入24ml无水乙醇) | 16ml (+24ml) |
| D0051S-5 | 洗脱液 | 10ml |
| D0051S-6 | Glycogen (20mg/ml, DNase free) | 50μl |
| - | 说明书 | 1份 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D0051M-1 | BeyoMag™磁珠 | 4ml |
| D0051M-2 | 蛋白酶K | 4ml |
| D0051M-3 | 洗涤液Ⅰ (首次使用前加入28ml无水乙醇) | 84ml (+28ml) |
| D0051M-4 | 洗涤液Ⅱ (首次使用前加入96ml无水乙醇) | 64ml (+96ml) |
| D0051M-5 | 洗脱液 | 40ml |
| D0051M-6 | Glycogen (20mg/ml, DNase free) | 200μl |
| - | 说明书 | 1份 |
保存条件：
蛋白酶K和Glycogen -20ºC保存，其余均室温保存，一年有效。其中BeyoMag™磁珠长期不使用时，可以4ºC保存，4ºC可以保存更长时间。蛋白酶K和Glycogen室温(15-25ºC)存放，至少一周有效。
注意事项：
需自备磁分离装置，推荐使用碧云天的1.5/2ml磁分离架(FMS004/FMS008/FMS012/FMS016/FMS024)。
首次使用前洗涤液Ⅰ和洗涤液Ⅱ需按照说明书和标签上的指示添加无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
磁珠在静置后会发生沉降，使用前一定要适当涡旋震荡或颠倒数次至充分混匀。
磁分离前应适度震荡离心管使磁珠充分分散后再靠近磁场。如果出现磁珠挂壁现象，可以在磁珠聚集后晃动管内液体，使挂壁的磁珠流下。
请使用推荐的样品量。如果样品量过大，可能造成磁珠聚集，会影响洗涤进而影响抽提获得的DNA纯度。发生磁珠聚集时，洗涤时需尽量分散磁珠，这样可有效改善抽提效果。如果发生磁珠聚集现象，建议在后续实验中适当减少样品用量。
本试剂盒的某些步骤需使用55ºC水浴，请提前作好准备。
除特别说明外，每次Vortex应控制在5-10秒左右。
本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。
建议使用带滤芯的吸头配制PCR体系，这样可以最大限度的避免污染导致的假阳性。推荐BeyoGold™无菌滤芯盒装吸头(FTIP631/FTIP635/FTIP638)。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程，无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞，高效的保护RNA，又不会影响高效反转录反应，且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒（KR105，TIANGEN），一站式完成从细胞到cDNA的快速制备，同时去除基因组DNA残留，整个操作流程仅需50 min，获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样，冷冻保存供以后使用，是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择，并可实现高通量检测。 图
滤芯的枪头；不同样本尽量避免同时开盖或剧烈震荡样本，也要避免反复吹吸导至的气溶胶形成和扩散。一旦发生样本溢出，应马上进行清污，降低对后续实验造成的影响。 实验室设备的污染 对于核酸提取仪、实验台面、超净台等可在实验结束后用 70% 的乙醇或者 10% 的次氯酸钠（具腐蚀性，建议使用前咨询设备供应商）擦拭或者利用紫外线照射 5-20 分钟进行表面清洁。如果需要对残留的核酸进行更彻底的清洁， DNAZap™ PCR DNA Degradation Solutions 能更有针对性地降解仪器
模抽提，但其不足之处是纯度(蛋白质残留) 不够稳定，蛋白质的沉淀效率在4℃会更好一些。三、离心柱法离心柱纯化法，是目前试剂盒提取广泛应用的方法。其最大特点是受人为操作因素影响小，纯度的稳定性很高(虽然纯度不一定比PC 纯化方法更高)。加入的液体通过离心后会进入另外一个离心管中，与含有核酸的柱子完全是分开的，所以洗涤更彻底。其致命弱点是样品过量，提取效率较低，且需要反复离心，操作复杂，成本也较高。四、生物磁珠法生物磁珠法是将纯化介质包被在纳米级生物磁珠表面，通过介质对核酸的吸附，在外加磁场下使核酸附着
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