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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 英文名:
RNase HII (2 U/μL)
- 保质期:
2年
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件:
-20度
- 规格:
50 U(14539ES50)/250 U(14539ES72)
| 规格: | 50 U(14539ES50) | 产品价格: | ¥185.00 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 250 U(14539ES72) | 产品价格: | ¥885.00 |
RNase HII是来源于深渊热球菌 (Pyrococcus abyssi, P.a.),经E.Coli大肠杆菌重组表达获得的核糖核酸内切酶。它识别DNA-rN-DNA/DNA双链,在DNA掺入核糖核苷酸的位点进行切割,但对单链RNA切割活性极低,对dsDNA、ssDNA无切割活性。RNase HII在单核糖核苷酸残基处从 5’端进行切割,切割后产生一个 5′ 端磷酸基团和一个 3′ 端羟基。该RNase HII酶在70~75°C具有最佳活性,在50°C~75°C间均具有活性,但是室温下活性极低。本品极度耐热,95°C孵育45 min后,几乎没有活性损失,可与PCR各反应体系兼容。
组分信息
| 产品名称 | 14539ES50 | 14539ES72 |
| RNase HII(2 U/μL) | 25 μL | 125 μL |
储存条件
-25~-15℃保存,有效期2年。
产品应用
1. LAMP 高灵敏度探针法检测。
2. RNase HII 依赖性 PCR(rhPCR)。
3. 切除聚合酶聚合过程中错配形成的核糖核苷酸。
4. 冈崎片段 RNA 部分的降解。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20231222
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文献和实验)1.5 μL,LATaq DNA 聚合酶(5 U/μL)1.5 U,dd H2O 补足 25 μL。将首轮扩增产物以 TE 缓冲液(pH 8.0)稀释 10 倍作为 Nested PCR 的模板。扩增程序:94 ℃ 25 s,72 ℃ 4 min,7 个循环;94 ℃ 25 s,67 ℃ 4 min,32 个循环;67 ℃ 7 min,4 ℃ 保存。方法二 TAIL-PCR 技术1 基因组 DNA 提取(同上)2 TAIL-PCR 引物设计根据已知的基因组 DNA 片段序列,以待扩增的 5' 末端
l、100 mM UTP 0.06 μl,加DEPC H2O至100 μl。 2. 杂交缓冲液 IPES 0.134 g、0.5 M EDTA(pH8.0)20 μl、5 M NaCl 0.8 ml、甲酰胺8 ml,加DEPC H2O至10 ml。 3. RNase消化液:5 M NaCl 120 μl、1 M Tris-HCl(pH7.4) 20 μl、0.5 M EDTA(pH 8.0)20 μl、RNase A(10 mg/ml) 8 μl、RNase T1(250 U/μl
的 Eppendorf 管中,加 2μl 10 ×限制性内切酶缓冲液,6 ~ 10 个 U 的相应限制性内切酶,加消毒双蒸水至总体积 20μl ,于 37 ℃保温酶解 2 小时,按上述条件用适当的几种不同的内切酶进行单酶或双酶解。(2 )在 65 ℃加热 5 分钟或用适量的 0.5 mol / L EDTANa2 终止反应。2 .DNA 酶解片段的电泳分离取DNA 酶解作品 2μl 加上样缓冲液 10μl (含溴酚蓝指示剂和甘油),在 0.8 %琼脂糖(含 0.5μg / ml 溴化乙锭)凝胶进行水平电泳,电压











