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igg sepharose ff index层析柱ge
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文献和实验【原创】Protein A Sepharose 之进化篇。。。
的是经过GE填料洗脱后稀释不同浓度抗体。7号孔点的是上柱后穿流人血清。8号孔点的是上柱前人血清。9号孔点的是Marker。 从图中，我们可以看出，与GE公司rProtein A Sepharose FF填料从人血清纯化抗体纯度比较，Putus填料纯化的抗体纯度更高。更重要的是，后者的洗脱条件仅为4.5，高于前者的洗脱条件3.4。使用具备较少B结构域的Protein A柱能获得高纯度的IgG，并且洗脱条件温和，对蛋白质的损伤小。
相关专题 (一) 原理 葡萄球菌A蛋白(SPA)具有与多种哺乳动物 IgG分子Fc段结合的能力，并与不同IgG亚类的结合力有所差别。利用改变PH及离子强度可洗脱结合于SPA-Sepharose CL-4B柱上的IgG或不同的IgG亚类，可直接纯化血清或小鼠腹水中的IgG抗体。 (二) 操作步骤 用0.1M PH8.0 磷酸缓冲液 浸泡SPA-Sepharose CL-4B凝胶，15min。按1g干胶200ml
液 5．pH3.2盐酸－甘氨酸液 6．生理盐水 7．待提取的IgG样品 8．层析柱(2cm×10cm) 9．磁力 搅拌器 10．751分光光度计 (三) 操作方法 1．Sepharose－SPA的制备 在50ml三角烧瓶中加入 蒸馏 水20ml，加入固体溴化氰1.4g，加盖后温和振荡，使之溶解。倒入已盛有 琼脂 糖珠(4B)的烧杯中，立即搅拌
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