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deaesepharose离子交换层析 deae柱ge
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文献和实验离子交换层析原理 离子交换层析是根据生物分子的带电荷差异进行分离的一种吸附性层析。当生物分子通过离子交换层析介质的时候，带电荷的分子和层析填料上的相反电荷之间产生静电吸附，这是一种可逆的相互作用，在使用缓冲液洗脱时，不同电荷数量的生物分子，其洗脱缓冲液的浓度不同，从而使生物分子通过离子交换层析介质后得到分离的效果。 特点 介质种类繁多，具有高选择性 pH是离子交换层析至关重要的参数，pH的不同会导致整个实验结果的差异 操作简单，易于控制 属于吸附性层析，通常载量很高，具有浓缩作用 洗脱
一、原理deae-sephadex a-50（二乙氨基—乙基-葡萄糖凝胶a-50）为弱碱性阳离子交换剂。用NaOH将Cl-型转变为OH-型后，可吸附酸性蛋白。血清中的γ球蛋白属于中性蛋白（等电点为pH6.85～7.5），其余均属酸性蛋白。pH7.2～7.4的环境中，酸性蛋白均被deae- sephadex a-50吸附，只有γ球蛋白不被吸附。因此，通过柱层析，γ球蛋白便可在洗脱中先流出，而其他蛋白则被吸附在柱上，从而便可分离获得纯化的IgG。1、试剂（1）盐析提取的人γ球蛋白（2）0.5N
。DEAE-sephadexA-50柱层析是离子交换层析的一种。 (二) 试剂 和器材 1、 试剂 : (1)盐析提取的人γ球蛋白； (2)0.5N NaOH，0.5N HCl 2M NaCl，10％NaN3； (3)DEAE-Sephadex A-50，聚乙二醇(PEG)； (4)0.1M, PH7.4 PB(配制见盐析部分)； 2、器材:
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