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文献和实验」进行分离。 每种层析技术各有优势和特点,「组团出道」才能到达最佳的纯化效果。希望通过这份密卷,能够加速大家的纯化之路,由凝胶过滤、标签蛋白纯化、抗体纯化、离子交换、层析空柱等内容构成。 绝招一:凝胶过滤预装柱堵了、超压的处理方式 可能原因:缓冲液或样品未进行过滤、蛋白沉淀或杂质残留、清洗不及时等引起层析柱滤膜堵塞;流速过快、流动相粘度(如乙醇等)过高、温度过低。 建议处理方法:首先卸柱子,确定是系统还是柱子堵了。如果是柱子堵了:参考说明书 CIP 操作进行清洁;更换层析柱顶端滤膜
在ÄKTA 上连接上相应填料的 1 ml 的 HiTrap 的柱子或者小试的层析柱(如果涉及到工艺放大,小试的层析柱的高度应该与工业柱子的高度一致,保证放大前后的样品的保留时间也就是样品与填料的接触时间一致。 ② 步骤二:充分平衡柱子 使用 5 个柱床体积的结合缓冲液(平衡缓冲液)充分平衡柱子。 ③ 步骤三:计算动态载量 在一定的流速下(例如:线性流速 300 cm/h)连续上样(真实
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