Cytiva GST SpinTrap 快速小规模纯化GST

纯化新思路——构建双标签蛋白

StrepⅡ-六组氨酸-蛋白   02双标签蛋白可促进目的蛋白增溶性和特异性双重提高 当组氨酸标签蛋白表达量低，或纯化过程中蛋白不稳定时，可能是由于目的蛋白疏水性强导致溶解性不高、或未能正确折叠形成包涵体影响纯化效果。大分子增溶性蛋白标签，如 GST、MBP 标签可改善这一问题。但一步亲和难以满足高纯度蛋白的要求。大分子标签与小分子标签组合的双标签蛋白不仅可以提高目的蛋白溶解性和稳定性，还可以提高目的蛋白的特异性。 下图展示的是双标签绿色荧光蛋白（六组氨酸-绿色

要做好标签蛋白质的纯化实验，选好填料和预装柱很重要

老话说的好，巧妇难为无米之炊，要做好标签蛋白质的纯化实验，首先得选择合适的填料和预装柱，以达到事半功倍的效果。我们今天就来看看 Cytiva 标签蛋白填料的大家族，一起 pick 最适合您蛋白质研究的填料吧！ 蛋白标签（Protein Tag） 所谓蛋白标签（Protein Tag）是指利用 DNA 体外重组技术，与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表达、检测、示踪、和纯化等。常用的标签有His、GST、Strep、MBP、Flag 和组合式的双标签。Cytiva 可为

亲和层析

蛋白等） 可以完成一般方法很难完成的分离，如变性和非变性蛋白、功能不同的蛋白的分离 属于一种吸附层析，载量高，具有高效的捕获和浓缩作用。   基本步骤 亲和层析作为一种吸附性层析，主要步骤包括平衡、上样、清洗、洗脱和再平衡步骤 （图10)。由于亲和作用需要在特定的条件下结合和洗脱，亲和层析需要使用特定的结合缓冲液和洗脱缓冲液。 图10 亲和层析的基本步骤    适用性 带有标签的融合蛋白纯化，如His标签蛋白、GST标签蛋白等。 抗体及抗体片段的纯化 其他和某些配基有特异性结合作用的分子的纯化