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- 2025年11月16日
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Cytiva
| 应用 | 与 ECL 和 ECL PlusTM 蛋白质印迹检测试剂一起使用时，用于封闭硝酸纤维素膜和 PVDF 膜 |
| 颜色 | 白色 |
| 组件 | 40 g ECL 封闭剂，支持至少 20 个小型印迹 |
| 自生产日期起的估计有效期 | 18 个月 |
| 储存条件 | 2 – 8°C |
| 过流部件 | 否 |
| 包装规格 | 40 g |
在蛋白质印迹过程中，抗体与膜的非特异性结合不利于测定的特异性和灵敏性。为解决这个问题，必须封闭膜上尚未被蛋白质占据的部分。
当与 Amersham ECL 化学发光检测试剂（例如 Amersham ECL、ECL start、ECL Prime 和 ECL Select）一起使用时，Amersham ECL 封闭剂可用于封闭 Amersham Protran 硝酸纤维素 (NC) 和 Amersham Hybond 聚偏二氟乙烯 (PVDF) 膜。每包含 40 g 封闭剂，支持至少 20 个小型印迹。
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文献和实验Western blotting using ECL reagent
REAGENTSECL Western blotting kit (Amersham Life Science; cat# RPN2108): contains second antibodies for both mouse and rabbit, substrate and milk blocker (the milk blocker is not normally used when using ruminant samples).Hybond ECL nitrocellulose
Ecl 显色原理：鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。在Ecl底物中，含有H2O2和鲁米诺，在HRP（辣根过氧化物酶）的作用下，发出荧光来。 试验步骤： 1）将两种显色底物1：1等体积混合（一般各1ml/membrane）。 2）将混合物覆盖在膜表面，1-2分钟，摇晃使均匀。 3）用保鲜膜把膜包起来，放入夹板中。 4）在暗室中将X光片，覆盖在膜的上面，夹好夹子，曝光1min。 5）显影、定影。 6）根据结果调整曝光时间和曝光区域，得到
而现在最常用的是化学发光法：HRP化学发光底物 Luminol（ECL法chemiluminescence）及其改良法， 13. 常见问题分析与解决方案 13.2其他常见问题分析 无信号 一抗和二抗不匹配 二抗需和一抗宿主的物种相同（如一抗来自兔，二抗为抗兔抗体）。 没有足够的一抗或二抗结合目标蛋白 使用高浓度抗体。4°C延长孵育时间（如过夜）。 封闭剂与一抗
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