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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20°C储存
- 英文名:
PEG Biotin, mPEG-Biotin
- 库存:
现货
- 供应商:
上海阿拉丁生化科技股份有限公司
- 规格:
P164159-500mg/P164159-1g
| 规格: | P164159-500mg | 产品价格: | ¥340.9 |
|---|---|---|---|
| 规格: | P164159-1g | 产品价格: | ¥490.9 |
Biotin functionalized polyethylene glycol (PEG-Biotin) is an avidin or streptavidin binding PEG derivative that is used to biotinylate biomolecules or other material surfaces. Biotin can be easily detected by biotin/streptavidin binding assay and is widely used for molecule target detection.
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文献和实验我收集的几个Northern杂交protocol(同位素,DIG,生物素等),供大家参考!
0.25mg/L PEG (3500~8000均可,在缓冲液中加入2%~3% 的PEG可提高平端连接效率)。 无菌蒸馏水(SDW) 试验程序 1. 建立以下反应体系(终体积20μl): 4μl 质粒 ( 50μg/μl) 6μl 目的DNA ( 100μg/μl) 2μl 10X 连接缓冲液 2μl DNA 连接酶 6μl 无菌蒸馏水 2. 反应管置于15℃条件下保温反应24小时,65℃加热10min.终止反应。 3.取5~10μl连接反应物用微型凝胶电泳检测连接效果,其余反应
值被确定以后便可进行标记。具体步骤如下: (1)根据用以标记的胶体金的总量计算出所需要的待标记蛋白质的总量。 (2)在电磁搅拌下,将蛋白质溶液加入胶体金溶液中(pH已调至PI超过0.5pH),加入蛋白质时应逐滴加入,1mg的蛋白质大约5min加完。 (3)在磁性搅拌下加入5%的牛血清白蛋白(BSA)使其终浓度为1%,或加入3%聚乙二醇(PEG MW20000)使其终浓度为0.05%, 我们对比了BSA和PEG稳定胶体金的效果,BSA稳定的标记胶体金,放在4℃达2年半仍然保持良好性能,而用PEG
肽片段。混合的样品用抗生物素蛋白亲和层析法分离。这些肽段还可以进一步通过反向毛细管液相色谱和MALDI-TOF或QTOF2质谱进行分析,质谱后得到的相差8Da 的同位素分子质量峰,这些峰的比率可以作为与原样品各个蛋白相关量的测量尺度, 如一对峰相差8 个质量数,则为同一种蛋白质, 由D0和D8 峰的相对强度进行相对定量。由于ICAT在化学结构上相同且在分子量上只相差8 个中子,所以在用MS 检测时相对量的可信性有所提高。同样的, LC-ESI-MS 也可根据重和轻肽段的相对量提供蛋白的定量信息
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