SgeI，阿拉丁

产品介绍：

SgeI可切割在单链或双链DNA上含有5-甲基胞嘧啶的DNA靶标。SgeI限制性内切酶可识别m5CNNG(9/13)^位点，并于37℃下在其独特的缓冲液中的切割效果最佳。为确保一致的性能，该酶储存缓冲液中包含预混合BSA，其可增强酶的稳定性，并与DNA制剂中可能存在的污染物相结合。

注意事项：

内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。底物至少需要2个SgeI识别序列才能有效酶切。甲基化DNA完全酶切取决于SgeI的识别位点的数量，另外由于识别位点酶切产生的DNA产物会促进SgeI的非特异性酶切，因此，建议酶切时优化SgeI酶量用于酶切反应。不含核酸酶的超纯水推荐选购阿拉丁的ST876 Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile)。如果发现预期的酶切位点不能切开，请确认是否存在甲基化干扰问题。同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性，遇到可能存在甲基化干扰问题时，可以尝试同裂酶。本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

1.单酶切时可以参考如下反应体系，在冰浴上进行操作。 Reagent Plasmid DNA Ultrapure Water to 20µl 10XSgeⅠBuffer 2µl Substrate DNA xµl (up to0.5- 2µg) SgeI 0.2-1µl Total volume 20µl Incubate at 37℃ 1h 注：反应体系可以按比例放大或缩小。反应时间不建议超过1h。a.参考上表依次加入各种液体后，用移液器轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋混合)，然后瞬时离心以沉降液体至管底。b.37℃温育1h。酶切反应时优先推荐使用水浴，反应温度通常更加恒定一些。c.80℃温育20min即可使酶失活并停止反应(可选)。2.双或多酶切时可以在参考上表单酶切反应体系设置的基础上，参考如下原则设置反应体系。a.每种内切酶的用量为1μl，并根据需要适当扩大反应体系；b.所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10；c.如果所用的几种内切酶的最适反应温度不同，应先从最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，在其最适反应温度下进行酶切反应。